- 74
- 0
- 约3.1千字
- 约 4页
- 2022-09-01 发布于上海
- 举报
显 微 鉴 别 法
显微鉴别法系指用显微镜对药材(饮片)切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。鉴别时选择具有代表性的供试品,根据各品种鉴别项的规定制片。制剂根据不同剂型适当处理后制片.
一、药材(饮片)显徽制片
横切片或纵切片制片取供试品欲观察部位,经软化处理后,用徒手或滑走切片法,切成 10~20μm的薄片,必要时可包埋后切片。选取平整的薄片置载玻片上,根据观察对象不同,滴加甘油醋酸试液(取甘油、50%醋酸与水各 1 份, 混合,即得)、水合氯醛试液(取水合氯醛 50g,加水 15ml 与甘油 10ml 使溶解, 即得)或其他试液 1~2 滴,盖上盖玻片。必要时滴加水合氯醛试液后,在酒精灯上加热透化,并滴加甘油乙醇(取甘油、稀乙醇各 1 份,混合)试液或稀甘油, 盖上盖玻片。
粉末制片供试品粉末过四号(65 目)筛,挑取少许置载玻片上,滴加甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其他适宜的试液,盖上盖玻片。必要时,按上法加热透化。
表面制片将供试品湿润软化后,剪取欲观察部位约 4mm2,一正一反置载玻片上,或撕取表皮,加适宜的试液或加热透化后,盖上盖玻片。
解离组织制片将供试品切成长约 5mm,直径约 2mm 的段或厚约 1mm 的片,如供试品中薄壁组织占大部分,木化组织少或分散存在,采用氢氧化钾法, 若供试品质地坚硬,木化组织较多或集成较大群束,采用硝铬酸法或氯酸钾法。
氢氧化钾法将供试品置试管中,加 5%氢氧化钾溶液适量,加热至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去碱液,加水洗涤后,取少量置载玻片上,用解剖针撕开,滴加稀甘油,盖上盖玻片。
硝铬酸法将供试品置试管中,加硝铬酸((1)取硝酸 10ml,加入 100ml
水中,混匀。(2)取三氧化铬 10g,加水 100ml 使溶解。用时将两液等量混合,
即得)试液适量,放置至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤后,照上法装片。
氯酸钾法将供试品置试管中,加硝酸溶液(1→2)及氯酸钾少量,缓
缓加热,待产生的气泡渐少时,再及时加入氯酸钾少量,以维持气泡稳定地发生, 至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤后,照上法装片。
花粉粒与孢子制片取花粉、花药(或小的花)、孢子或孢子囊群(干燥的供试品浸于冰醋酸中软化),用玻璃棒研碎,经纱布过滤至离心管中,离心,取沉淀加新配制的醋醉与硫酸(9:1)的混合液 1~3ml,置水浴上加热 2~3 分钟, 离心,取沉淀,用水洗涤2 次,取沉淀少量置载玻片上,滴加水合氯醛试液,盖上盖玻片,或加 50%甘油与 1%苯酚各 1~2 滴,用品红甘油胶〔取明胶 1g,加水 6ml,浸泡至溶化,再加甘油 7ml,加热并轻轻搅拌至完全混匀,用纱布过滤至培养皿中,加碱性品红溶液(碱性品红 0.1g,加无水乙醇 600ml 及樟油 80ml, 溶解)适量,混匀,凝固后即得〕封藏。
磨片制片坚硬的动物、矿物类药,可采用磨片法制片。选取厚度约 1~2mm
的供试材料,置粗磨石(或磨砂玻璃板)上,加适量水,用食指、中指夹住或压住材料,在磨石上往返磨砺,待两面磨平,且厚度约数百微米时,将材料移置细磨石上,加水,用软木塞压在材料上,往返磨砺至透明,用水冲洗,再用乙醇处理和甘油乙醇试液装片。
二、含饮片粉末的制剂显微制片
按供试品不同剂型,散剂、胶囊剂(内容物为颗粒状,应研细),可直接取适量粉末;片剂取 2~3 片,水丸、糊丸、水蜜丸、锭剂等(包衣者除去包衣),取数丸或 1~2 锭,分别置乳钵中研成粉末,取适量粉末;蜜丸应将药丸切开, 从切面由外至中央挑取适量样品或用水脱蜜后,吸取沉淀物少量。根据观察对象不同,分别按粉末制片法制片(1~5 片)。
三、细胞壁性质的鉴别
木质化细胞壁加间苯三酚试液 1~2 滴,稍放置,加盐酸 1 滴,因木质化程度不同,显红色或紫红色(间苯三酚试液取间苯三酚 0.5g,加乙醇使溶解成
25ml,即得。本品应置玻璃塞瓶中,在暗处保存;间苯三酚盐酸试液取间苯三 酚 0.1g,加乙醇 1ml,再加盐酸 9ml,混匀。本液应临用新制)。
木栓化或角质化细胞璧加苏丹Ⅲ试液(取苏丹Ⅲ0.01g,加 90%乙醇 5ml
溶解后,加甘油 5ml,摇匀,即得),稍放置或微热,显橘红色至红色。
纤维素细胞壁加氯化锌碘试液(取氯化锌 20g,加水 10ml 使溶解,加碘化钾 2g 溶解后,再加碘使饱和,即得),或先加碘试液湿润后,稍放置,再加硫酸溶液(33→50),显蓝色或紫色。
硅质化细胞壁加硫酸无变化。四、细胞内含物性质的鉴别
淀粉粒
加碘试液(取碘0.5g 与碘化钾 1.5g,加水 25ml 使溶解),显蓝色或紫色。
用甘油醋酸试液装片,置偏光显微镶下观察,未糊化的淀粉粒显偏光现象;已糊化的无偏光现象。
糊粉
您可能关注的文档
最近下载
- 武汉农村商业银行2010年度报告pdf.pdf VIP
- 委托拍卖标的明细标准表格.docx VIP
- 脑膜炎(细菌性)和脑膜炎球菌病的识别、诊断和管理PPT 课件.pptx VIP
- 化脓性脑膜炎诊疗指南.pptx VIP
- 光宝EVO6800变频器说明书.pdf VIP
- DB31_T 1108-2018 监护型救护车配置规范(完整).pdf VIP
- 2025WHO《脑膜炎诊断、治疗和护理指南》解读PPT课件.pptx VIP
- 2025WHO《脑膜炎诊断、治疗和护理指南》解读PPT课件.pptx VIP
- 2025WHO《脑膜炎诊断、治疗和护理指南》解读PPT课件.pptx VIP
- 2025年高考数学试卷(广东)及全详细解析_v2.0.docx VIP
原创力文档

文档评论(0)