转录及转录后加工.pptVIP

⑴ 修饰的化学反应： ⑵ 5′-端的修饰在核内完成，且先于中段剪切。 ⑶ 5′帽子分Cap0、Cap1、Cap2。 （一）5′-端加上帽子结构(mGpppNp—） 5′pppN… 磷酸酶 ppi 5′pN… pppG pi 5′GpppN… 甲基化酶 +CH3 m7GpppN… 第62页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 mRNA帽子的生理功能： ⑶ 促进某些RNA的合成。 ⑴ 帽子结构参与翻译起始，帽0结构是核糖体识别 mRNA所必需的；核糖体上有帽结合蛋白。 ⑵ 帽子结构增加mRNA的稳定性，保护mRNA防 止其受5′核酸外切酶的降解。 第63页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 （二）3′-端加上多聚腺苷酸尾巴(polyA)。 ⑴ polyA的出现不依赖DNA模板。 ⑵ 加尾信号：3′-末端出现AAUAAA及下游的 GU丰富区。在两序列之间由特异的核酸内 切酶切除多余的核苷酸，然后加上poly A。 尾部修饰和转录终止同时进行。 ⑶ 3′-端修饰也在核内完成，并先于mRNA中段 的剪接。 ⑷ polyA的有无及长短是维持mRNA作为翻译模 板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 第64页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 第65页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 mRNA3′-端的多聚腺苷酸化可被冬虫夏草素 （ 3′-脱氧胸苷）所阻止； 即冬虫夏草素是多聚腺苷酸化的特异抑制剂。 （三）mRNA的甲基化 真核生物mRNA分子中有许多甲基化的碱基， 主要是：N6-甲基腺嘌呤（m6A）。 第66页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 5、增强子（enhancer）： 能结合反式作用因子，决定基因的时间和空间 特异性表达，增强启动子转录活性的DNA序列。 增强子作用特点： ⑴ 增强效应十分明显：使转录频率增加百倍或千倍。 ⑵ 增强效应与其所处的位置和取向无关： 增强子以5′→3′或 3′→5′排列对启动子都有作用。 ⑶ 大多为重复序列：长约50bp，适合与反式因子结合，内部常有一个核心序列，为增强效应所必需。 ⑷ 增强效应具有严密的组织和细胞特异性。 ⑸ 没有基因专一性。 ⑹ 许多增强子受外部信号的调控。 第30页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 GCGC-CAAT-TATA-ATG AATAAA 切离加尾 真正终止点 修饰点 外显子 内含子 翻译起始 转录起始 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 真核生物RNApolⅡ的启动子 第31页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 （三）RNA聚合酶 Ⅲ 的启动子 即 tRNA基因的启动子，称Ⅲ类启动子。 Ⅲ类启动子位于转录起始点下游，称 下游启动子或内部启动子。 Ⅲ类启动子包括：A盒、B盒 A盒靠近5′方向； B盒 靠近3 ′方向 。 Ⅲ类启动子需要的转录因子包括： TF Ⅲ C、TF Ⅲ B、TF Ⅲ A，前两者是共同 的，后者为5S rRNA基因转录所需。 第32页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 第33页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 三、原核生物和真核生物 转录起始位点的结构差异 原核生物 真核生物 帽子结构 没有 有 起始核苷酸 嘌呤或嘧啶 嘌呤（A为主） 启动区范围 较小(＋1～－70) 较大 (＋1～－110) 上游序列 TTGACA CAAT、GC、增强子 第34页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 图5-4 P155页 原核生物与真核生物启动子比较 第35页，共94页，2022年，5月20日，9点48分，星期六 原核生物和真核生物转录及抑制剂 第 四 节 原核生物转录的起始 原核生物转录的延长 原核生物转录的终止与新合成RNA链的释放 真核生物的转录 RNA生物合成抑制剂 第36页，共94页，2022年，5月20日