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- 2022-09-04 发布于山东
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MTT原理步骤结果解析方法及注意事项(精)
MTT原理步骤结果解析方法及注意事项(精)
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MTT原理步骤结果解析方法及注意事项(精)
MTT原理、步骤、结果解析方法及注意事项
宣布日期:2006-12-6热门指数:2025
MTT
解析法以活细胞代谢物还原剂
3-(4,5)-dimethylthiahiazo
(-z-y1)-3,5-di-
phenytetrazoliumromide,MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,
可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环
开裂,生成蓝色的formazan结晶,formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比(死细胞
中琥珀酸脱氢酶消失,不能够将MTT还原)。还原生成的formazan结晶可在含50%的N,N-
二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸钠(pH4.7)的MTT溶解液中溶解,利用酶标仪测定
490nm处的光密度OD值,以反响出活细胞数目。也能够用DMSO来溶解。
MTT粉末和溶液保存时都需要避光,用铝箔纸包好就可以。实验的时候我一般关闭超净台上的日光灯来避光,感觉这样比较好。
MTT
步骤以下:
1:接种细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔
1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200
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