ffatp合酶的发现学习.pptxVIP

三磷酸腺苷 (ATP) ——能量货币;能量货币不贬值 ;博耶和沃克揭开了ATP合成酶的隐秘,从而探明“能量货币”A T P 的形成过程。 斯科发现了离子传输 酶,这种酶即ATP合成 酶的一种存在形式,起着离子泵的作用。 他们共同说明了“能量货币不贬值”的道理 。 ;这三位科学家的工作都围绕生物体能量的主要提供者——ATP 博耶和沃克的主要研究方向是 ATP合酶。 斯科则由于发现 Na+／K+ 泵而获此殊荣。;80年代初,沃克发现 了ATP合酶,从而找到了第5种线粒体内膜脂蛋 白—复合体V,与??他4种复合体在结构上互不相同。每种复合体都是内膜的结构成分,具有蛋 白质的通性,与磷脂结成膜结构,并都有一套独特 的载体,承担电子传递过程 的部分酶促反应。;沃克深入研究发现,ATP合酶的分子量约为50万道尔顿。当这种复合休处于分离状态时,便能够水解ATP;当处于正常自然位置时,起作用相反,能够合成ATP。 ;沃克证实,APT合成酶是由10个多肽链组成的复 合体,其中5个是膜固有的蛋白质,5个是膜周围的蛋白质。周围蛋白质朝 向内膜的基质面突伸,而构成整个复合体的一个亚单位,称作F1ATP酶,这就是ATP合成酶进行可逆反应的场所。固有本体蛋白质组成复合体的另一个亚单位,称作FoATP酶，对 ATP合成起调控作用。沃克还 利用分子生物技术对5种膜周围蛋白质进行了纯化和分析,并测定了氨基酸成分。 ;第8页/共20页;他的研究集中于ATP合酶，并且显示酶如何利用氢流从ADP和无机酸盐形成三磷酸腺苷所产生的能量。博耶假设一种不平常的机制解释三磷酸腺苷合酶的特性，被称做“束缚转变机制”，已部分被沃克的研究所证实。;;1960年，在线粒体中找到了ATP合酶(或称F1F0-ATP酶)，人们惊奇地发现，尽管ATP合酶可以被称为自然界中最小的“轮机”，但它本身却是一个巨大的蛋白质复合体，包括了多种亚基 。ATP合酶可以分作两大部分 ，位于膜 内的F0 部分，以及位 于基质的类似头部 的 Fl部分。 ;在 70年代，科学家们证明ATP合成酶由3个部分组成：一是位于线粒体内膜的基部，二是由膜 内伸 出的“头部，在两者之间有一个“颈部使它们连接在一起。很多实验室的研究结果表 明，ATP合酶的催化中心位于多亚基的“头部”，其中3个β亚基起着关键作用，称为催化亚基，同时“颈部”在表现催化活性方面也是很重要 的，但是对整个ATP合酶如何合成ATP的机理 仍然是 一个谜 。;博耶认为，上述3个β亚基的构象是不相同 的：一种???象有利于合成ATP的前体 ADP和 Pi(磷酸)与之相结合。另一种构象可使结合的 ADP和Pi合成 ATP,第三种构象使ATP变成松驰结合状态，从而容易被释放下来。当 ADP和 Pi与一种构象的β亚基相结合以后，依次经历 了两次构象的变化，从而导致 ATP的合成并使之从ATP合成酶上释放下来。在ATP合成过程中3个β亚基通过转动，构象发生交替、反复 的变化 ，所需的能量是由跨膜的 H+ 流提供的 。这就是博耶的 ATP合成酶合成 ATP的构象假说，即旋转催化假说 。;Boyer认为，单拷贝的γ亚基处于其它亚基的中央，并且可以转动，如同三缸马达的机轴，带动与之相邻的β亚基旋转，发生构象上的变化。而穿过膜的质子流则如同水流一样驱动反应的进行，于是 ATP被连续不断地合成出来，供给细胞活动之用。 Boyer的假说虽然在当时就已经受到很多间接实验证据的支持，但它的真正得到承认，是在1994年 Walker小组发表了F1的晶体结构之后。Walker的研究表明，Boyer“结合变化机制”中对于 Fl结构的预测基本上是正确的，只是γ亚基伸出到(αβ)3中的一个，从而带动它们进行构象的转换。;博耶假说也可以形象比喻为：ATP合酶犹如一 部精密的分子水轮机，当 H+流跨膜转运时，带动ATP合成酶基部轮子似的结构和与之相连接的轴进行旋转，就象水流带动水轮机一样。这一转动继而引起与轴相连的3个叶片(即ATP合 成酶催化中心的3个β亚基)也随之转动起来并 发生一定的构象变化，结果使 ADP和Pi合成 ATP并将它释放下来 。;尽管 Boyer与Walker为了解 ATP合成的机制作 出了突出贡献 ，但他们获得今年 的诺贝尔奖 ，还得益于近两年发表的有关工作 ，包括 Cross小组、Junge小组和Yoshid小组。其中Yoshid等的工作最为有趣，他们将荧光标记的肌动蛋白纤维丝附着在F1的γ亚基上，当向反应体系中加入Mg2+~ATP后，就可以观察到γ亚基的顺时针转动。很多人认为，上述堪称精美的工作大大影响了诺贝尔评奖委员会，使他们迅速作出决定，把化学奖授予Boyer和Walker。;由于他发现了一种