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猪粪便沼液中多种抗生素残留量的LC—MSMS检测 　　摘要：采用固相萃取-超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法同时检测猪粪便、尿液和沼液中磺胺二甲嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺吡啶、磺胺甲氧哒嗪、恩诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、单诺沙星、红霉素等12种抗生素，优化了前处理和分离检测条件，12种目标物在10min内完成分析，在质量浓度1.00～100μg/l范围内线性良好，方法检出限为0.05～3.00ng/ml，实际水样加标回收率为62.5%～105.2%。 　　关键词：抗生素；粪便；沼液；固相萃取；超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法 　　中图分类号：ts254文献标志码：adoi：10.16693/j.cnki.1671-9646（x）.2019.03.045 　　determinationofresidualantibioticsinpigmanureand 　　biogasslurrybylc-msms 　　wangguangjie，xulina，yangling，jiangjielu，lijun，qujiejing 　　（shandongtongjitestingtechnologyco.，ltd.，yantai，shandong264004，china） 　　abstract：simultaneousdeterminationofpigfeces，urineandbiogasslurrybysolidphaseextractionultraperformanceliquidchromatographywiththreeheavyfourstagemassspectrometrysulfamethazine，sulfa-chloropyridazineetc.twelveantibiotics.thepretreatmentandseparationdetectionconditionswereoptimized.twelvetargetswereanalyzedwithin10minutes.thelinearityofthemethodwasgoodintherangeof1.00～100μg/l.thedetectionlimitwas0.05～3.00ng/ml.therecoveriesoftheactualwatersampleswas62.5%～105.2%. 　　keywords：antibiotics；feces；biogasliquid；solidphaseextraction；lc-msms 　　在最近几十年中，兽用抗生素使用量惊人，大量的饲用抗生素作为饲料添加剂长期使用，动物经排泄进入粪便、沼液中，造成药物残留和耐药基因的产生，包括动物致病菌和内在微生物菌群，进而对人类染病的医治和微生态环境构成潜在威胁，同时兽用抗生素在肉、蛋、乳等动物产品中残留通过一般的食品烹饪方法不能完全使其分解，从而对人产生毒副作用和耐药性。 　　据研究报道，对可食用动物使用的抗生素有25%～75%以母体药物的形式从粪尿中排出体外，并且在土壤中长期滞留[1]。有相当比例的兽药抗生素以母体药物或代谢产物的形式通过禽畜粪尿进入水体和土壤中，从而对环境造成了潜在威胁。 　　目前，抗生素的含量测定方法有微生物法、高效毛细管区带电泳法、薄层色谱法、酶联免疫法及高效液相色谱法[2-3]等。试验选择独特的样品处理方法，建立了一种快速、准确、分离度好的高效液相色谱质谱法。 　　1材料与方法 　　1.1主要仪器 　　watersh-class型与absciexapi4000plus型液相色谱质谱联用仪，配有电喷雾离子源（esi源）；spe固相萃取装置；氮吹仪；分析天平：感量分别为0.001g和0.00001g；高速冷冻离心机：转速≥10000r/min；冷冻干燥机等。 　　1.2主要试剂耗材 　　标准物质均为有证标准物质，购于坛墨质检、sigma等，纯度≥98%；乙腈（色谱纯），德国merck公司提供；edta（分析纯），国药集团化学试剂有限公司提供；其他试剂均为分析纯；试验用水为蒸馏水或去离子水；hlb固相萃取柱（200g/6l），美国waters公司提供。 　　1.3仪器分析条件 　　1.3.1色谱条件 　　色谱柱为behc18型（1.7μm，2.1mm×50mm），柱温40℃，进样体积5μl；流动相：a为0.1%甲酸水，b为乙腈；流速0.3ml/min。 　　梯度洗脱程序见表1。 　　1.3.2质谱条件 　　電离方式采用电喷雾离子