高等植物基因工程.ppt

D 高等植物的基因表达系统 9 高等植物基因工程 植物转基因技术已成为研究和改良植物遗传资源的强有力工具，其中启动子是决定基因表达部位、时间、强度的主要调控元件。花椰菜花斑病毒CaMV的35S启动子能在许多植物物种中的几乎所有发育阶段及所有组织中高效表达，它已经被广泛用于构建转基因植株。 在高等植物基因工程中，外源基因的时空特异性表达具有重要意义，因为很多外源基因的表达产物对植物早期的生长和发育有影响，甚至会致死植株。 第30页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 D 高等植物的基因表达系统 9 高等植物基因工程 外源基因的四环素诱导系统 外源基因的乙醇诱导系统 外源基因的地塞米松诱导系统 外源基因的类固醇诱导系统 第31页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的四环素诱导系统 Tc-on型四环素诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t TetR E.coli tetR 四环素阻遏蛋白基因表达盒 CaMV 35S P Plant nos t b-葡糖醛酸糖苷酶报告基因 GUS 四环素诱导型报告基因表达盒 tet 第32页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的四环素诱导系统 Tc-on型四环素诱导系统 TetR CaMV 35S P Plant nos t b-葡糖醛酸糖苷酶报告基因 GUS tet CaMV 35S P Plant nos t b-葡糖醛酸糖苷酶报告基因 GUS tet 显色反应 四环素 第33页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的四环素诱导系统 Tc-off型四环素阻遏系统 CaMV 35S P Plant nos t tTA融合蛋白 tetR tTA激活因子表达盒 CaMV 35S P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP 四环素阻遏型报告基因表达盒 tet VP16 第34页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的四环素诱导系统 Tc-off型四环素阻遏系统 CaMV 35S P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP tet CaMV 35S P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP tet 四环素 第35页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的乙醇诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t AlcR 巢曲霉菌 alcR 转录激活因子表达盒 CaMV 35S P Plant nos t 氯霉素乙酰转移酶基因 CAT 乙醇诱导型报告基因表达盒 alcA 启动子控制区 alcA 巢曲霉菌乙醇降解酶编码基因 第36页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的乙醇诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t AlcR 巢曲霉菌 alcR 转录激活因子表达盒 CaMV 35S P Plant nos t 氯霉素乙酰转移酶基因 CAT 乙醇诱导型报告基因表达盒 乙醇 氯霉素抗性 第37页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的地塞米松诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t tTA融合蛋白 Yeast Gal4 tTA激活因子表达盒 Plant P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP 地塞米松诱导型报告基因表达盒 Gal4 结合区 VP16 地塞米松诱导系统 Rat GR 酵母转录因子Gal4 大鼠激素受体蛋白 单纯疱疹病毒转录激活因子 第38页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的地塞米松诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t tTA融合蛋白 Yeast Gal4 VP16 地塞米松诱导系统 Rat GR Plant P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP Gal4 结合区 地塞米松 第39页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的地塞米松诱导系统 35S P pAcos t VP16 地塞米松诱导型四环素抑制型系统 GR tetR NLS pA35S t GUS 35S P tet 显色反应 tetR tet 结合蛋白 NLS 核定位信号序列 GR 激素受体蛋白 VP16 转录激活因子 GUS b-葡糖醛酸糖苷酶报告基因 四环素 地塞米松 第40页，共69页，2022年，5月20日，21点38分，星期四 外源基因的类固醇诱导系统 PG10-90 E9 t hER 雌激素诱导型的外源基因表达系统 lexA VP16 nos t hpt MCS lexA