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铁皮石斛组培快繁技术 铁皮石斛外植体可选择叶片、茎段、种子、细胞、组织等器官，但为了适合药用铁皮石 斛工厂化育苗的需要，通常选用未成熟种子（未成熟胚）作为外植体，有时也可选择茎段作 为外植体。 .种子作为外植体 种子的制备及消毒 每年5-6月对铁皮石斛的亲本进行人工授粉，11月取未成熟菊果，带入实验室，用流 水冲洗2?3min,去污剂浸泡lOmin （其间不时摇晃），然后流水冲洗lOmin,带入超净工 作台，先用70%酒精浸润30s, 0.1%升汞浸泡5?lOmin,无菌水冲洗3?5次，备用。 铁皮石斛无菌播种 将铁皮石斛期果置于无菌纸上，用解剖刀将菊果切开，将种子匀均播种于原球茎诱导培养 基（改良N6+NAA0.5mg/L+马铃薯提取液80g/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L, pH5.6）中，置于培 养室中培养，培养条件为25±2℃,光照1000LX,光照周期12h/d （开始7天给予暗培养）， 培养3个月后，铁皮石斛种子被诱导成原球茎（图9?3）。 图9-3铁皮石斛播种后培养不同时间原球茎诱导情况 a.播种30d； b.播种60d； c.播种90d 13原球茎分化增殖与壮苗生根培养 将原球茎转接至铁皮石斛分化增殖培养基（改良N6+NAA1.0mg/L+香蕉汁80g/L+琼脂 7g/L+蔗糖30g/L, pH5.6）中，置于培养室中培养，培养条件为25±2℃,光照1500LX,