C色谱柱维护常识.docVIP

C色谱柱保护知识 C色谱柱保护知识 C色谱柱保护知识 【谈论】高效液相色谱柱的保护 各位同仁，为保证我们的解析收效，延长色谱柱的使用寿命，大家一起来贡献一下自己在色谱柱使用过程中的护柱诀要吧。 我先来聊聊，算是抛砖引玉了 1、最好用预柱。（但要注意，若有时出峰异常，要先看看可否是它有问题了） 2、每次做完解析，都要进行冲洗， 解析用流动相中若无酸、碱、盐类物质，建议用90％甲醇冲洗30～60min；若解析用流动相中含以上物质，要先用10％甲醇（或用与解析用流动同样比率，把含酸、碱、盐溶液换成水）冲洗1小时左右，再梯度走到90％甲醇冲洗30～60min（若用多元泵）。有必要时再循环几次，能够合适缩短时间。 若长时间不用该色谱柱，要冲洗好后，用纯甲醇或乙腈封存。 3、若流动相中用到离子对试剂，更应该好好冲洗，且该色谱柱最好作为专用， 不能够再做其他物质解析用。因色谱柱填料性质已与原来所不一样，在该柱上所探究的色谱条件，可能在其他同类柱子上得不到重现。 4、尽量防范反冲，除非该色谱柱厂家明确说明赞成。 5、一般C18柱尽量防范在40℃以上的温度下解析。 6、如期测柱效，有下降，能够用10％异丙醇甲醇冲洗色谱柱。若柱效还没有改进，能够再生，甲醇－二氯甲烷－甲醇。 呵呵，还有的一时想不起来了，各位有经验的战友请公布高见！ 1．  样品要采用或  μm滤膜过滤，流动相采用  μm滤膜过滤并脱气。 2．大多数反相色谱柱的  pH  牢固范围是  2－，尽量不高出该色谱柱的  pH范围 3．防范流动相组成及极性的强烈变化。 4.防范纯水冲洗反相色谱柱。 5．每次测试达成，要用20倍柱体积的流动相冲洗色谱柱（解析色谱柱250×4.6mm柱体积）。若是使用极性或离子性的缓冲溶液作 流动相，应在实验达成后将柱子用纯水冲洗干净，并保留于乙腈中。 6．压力高升是需要更换预柱的信号。 1：溶剂中的不溶物—应使用色谱纯溶剂，膜过滤（孔径不高出μm） 2：样品中的不溶物—对付样品进行膜过滤（孔径不高出μm） 3：泵，进样器等中的不溶物—在泵和进样器之间安装内置过滤器，在进样器和柱之间安装预过滤器 4：柱内不溶物的形成：由于溶剂的不互溶而产生的积淀—用能溶解积淀物的溶剂冲洗色谱柱；在不互溶溶剂中由于进样而产生的积淀— 检查样品液和流动相可否互溶；由于温度的改变或固定相的枯竭而产生的积淀—将色谱柱密封紧，并保持室温恒定！ 还有就是平衡色谱柱、色谱柱的再生： 1平衡色谱柱：反相色谱柱在经过出厂测试后是保留在乙腈 运输过程中可能会干掉，因此在用流动相解析样品从前，应使用  /水中的。请必然保证您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储蓄或 10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；若是您所使用的流动相中含 有缓冲盐，应注意用纯水  过渡。 硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保留在正庚烷中的。若是该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相从前用乙醇或 异丙醇平衡 如何平衡色谱柱？ 平衡过程中，将流速缓慢地提高；用流动相平衡色谱柱直到获得牢固的基线（缓冲盐或离子对试剂浓度若是较低，则需要较长的时 间来平衡） 色谱柱的再生：进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。稀硫酸能够用来冲洗已污染的色谱柱！ 偶也来参加一下，谈一点拙见 1.关于一些特别型号的柱子，比方不一样型号的手性柱应严格依照柱子的相应说明书所要求的进行保护，并依照其规定的范围选择试剂的种类，比率，PH，等等； 2.尽量防范柱子进气泡的现象出现，如在实验过程中留神流动相的体积，同时对所需体积进行大概的估计，省得吸空，气泡进柱，尽管 有多种排气泡的方法，但毕竟影响柱子的性能，特别是比较“娇贵”的柱子； 每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在办理问题方面获得最大的补偿，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长！------必然得做！ 新的色谱柱在使用从前应该在您自己的液相色谱仪进步行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。而且，在今后的使用中，应经常对色谱柱进行测试。 卡套柱的安装（不加预柱）1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片 4．将卡套帽和卡套架旋在一起，尔后用手拧紧 5．尔后依同样的序次连接好柱子的另一端 6．连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可；若为不锈钢接头应使用专用扳手 注意：使用卡套柱时，两端的卡套应时辰连接在柱芯上。无论您是平衡色谱柱或是冲洗，任何时候都不能够将卡套取下来，否则会造成填料的流失。 卡套柱的安装（加预柱） 1．将卡套架套入柱芯 2．将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯（见左图） 3．将已套到柱芯上的卡套架