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阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞和大鼠胸主动脉平滑肌细胞Adropin相关基因及蛋白表达的影响
第一部分阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞Adropin相关基因及蛋白表达的 影响目的探讨阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞(human umbilical endothelial cell, HUVEC) Adropin相关基因及蛋白表达的影响。方法将不同浓度的阿托伐 他汀(0.002umol/l、0. 02umol/K 0. 2umol/K 2umol/K 20umol/l)与 HUVEC 共培养6小时(hour, h)、12h、24ho采用MTT法检测HUVEC的增殖情况。
半定量逆转录聚合酶链反应法检测HUVEC Adropin mRNA的表达。ELISA法 测定细胞上清液中Adropin蛋白的表达。结果1.不同浓度的阿托伐他汀与HUVEC 共培养6h时,20umol/l浓度组增殖活力明显高于对照组(Plt;0.05),其他各 浓度组差异无统计学意义。
共培养 12h 时,0. 02umol/K 0. 2umol/K 2umol/K 20umol/l 浓度组细胞 活力显著高于对照组(Plt;0. 05), 0.力mo著1、2umol/K 活umol/1浓度组活 力显著高于0. 002umol/l浓度组(Plt;0. 05)o共培养24h时,各浓度组细胞活 力均显著高于对照组(Plt;Q 05), 0. 02umol/K 0. 2umol/K 2umol/l 20umol/l 浓度组活力显著高于0. 002umol/l浓度组(Plt; 0. 05) o同一浓度阿托伐他汀分 别与HUVEC共培养6h、12h24h,12h和24h组活力明显高于6h组与lt ;0.05)。
2.不同浓度组阿托伐他汀与HUVEC共培养6h、12h、24h后,Adropin mRNA 的表达均显著高于对照组(Plt;0. 001), 0. 02umol/l 0. 2umol/K 2umol/K 20umol/l 浓度组 Adropin mRNA 的表达显著高于 0. 002umol/l 组(Plt;0. 001)。 同一浓度阿托伐他汀分别与HUVEC共培养6h、12h、24h, 12h和24h组mRNA表 达量明显高于6h组(Plt;0.01)o 3.不同浓度的阿托伐他汀与HUVEC分别共培 养6h、12h、24h,各浓度组HUVEC上清中Adropin蛋白的表达显著高于对照组
(Plt;0. 001), 0. 02umol/l 0. 2umol/l 2umol/l 20umo 1/1 浓度组 Adropin 蛋白的表达显著高于0. 002umol/l组(Plt;0. OODo
同一浓度阿托伐他汀分别与HUVEC共培养6h、12h、24h时,12h和24h组 蛋白表达量明显高于6h组(Plt;0.001)。4. Adropin蛋白含量与HUVEC吸光度 值(0D值)进行Pearson相关性分析显示不同时间段各浓度组adropin与0D值 呈显著正相关(6h,相关系数 r=0. 471, P=0. 049; 12h, r=0.相6, P=0. 001; 24h, r=0. 725, P=0. 001) o结论1.阿托伐他汀能够促进HUVEC的增殖,并呈剂量和时 间依赖性。
.阿托伐他汀能够促进HUVEC Adropin相关基因及蛋白的表达,且呈剂量和 时间依赖性。3. HUVEC的增殖活力与其Adropin蛋白的表达呈正相关。第二部 分阿托伐他汀对大鼠胸主动脉平滑肌细胞Adropin相关基因及蛋白表达的影响 目的探讨阿托伐他汀对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(rat aortic smooth muscle cell, RASMC) Adropin相关基因及蛋白表达的影响。
方法原代培养SD大鼠的RASMC,免疫荧光和免疫细胞化学染色法进行鉴定, 取4-5代细胞进行试验。.不同浓度的阿托伐他汀(0. 02umol/K 0. 2umol/K 2umol/K 20umol/l)与 RASMC 分别共培养 6h、12h、24h。采用 MTT 法检测 RASMC 的增殖情况。
半定量逆转录聚合酶链反应法检测RASMCAdropin mRNA的表达。ELISA法测 定细胞上清液中Adropin蛋白的表达。结果1.不同浓度的阿托伐他汀与RASMC 共培养24h时,各浓度组细胞活力显著低于对照组05), 0. 02umol/K 0. 2umol/l阿托伐他汀组活力明显高于20umol/组(Plt;0. 05)。
同一浓度阿托伐他汀与RASMC共培养6h、12h、24h, 12h和24h组活力明显 低于6h组(Plt;O. 05)o 2.不同浓度的阿托伐他汀与RASMC共培养,各浓度组 Ad
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