无菌试验方法验证.docxVIP

文件起草日期文件审核 文件起草 日期 文件审核 日期 文件批准 日期 无菌试验检查方法 验证资料 文件编号： 有限公司 概述 无菌检查法系用于检查药典要求的医疗器械产品是否无菌的一 种方法，其应在 1000 级下的局部 100 级的单向流空气区域内进行的， 其全过程应严格无菌操作，防止污染，以免供试品的检出误判定。 验证目的 通过验证，确认所采用的试验方法适用于本产品的无菌检查，以确认我公司的无菌检验的有效性，确保产品满足相关标准要求。 验证范围 在每个月的同一生产批（灭菌批）中选取序列号排在最后的产品 （为特制试验用，工艺与常规产品相同）（具体抽样量见表 1）。为了扩大样本量，每个月至少进行一次验证，连续不低于六个月，且根据产品特性，每月按规格大小分档选取样品。 表 1 批出厂产品最少检验数量 供试品 批产量 N（个） ≤100 接种每种培养基所需的最少检验数量 10%或 4 件（取较多者） 医疗器具 100＜N≤500 ＞500 10 件 2%或 20 件（取较少者） 验证人员及职责 管理者代表：XX，负责验证项目的确定及审批； 质控部：XX，负责验证方案的起草及组织实施； 质控部：XX，负责验证的操作执行。 质控部：XXX、XXX，负责检验的操作和复核。 文件准备和培训 检查验证所需的各类文件及记录资料，应齐全；相关的文件草案是否已具备。 组织 参加验证人员需进行本方案的学习。 验证条件及验证时间安排 验证条件 质控部检测的公用系统良好；仪表量器经过校验合格，且在有效期内。 供试品 至少 6 批 培养基及试剂： ①0.9%的氯化钠溶液 ②硫乙醇酸盐流体培养基 ③改良马丁培养基 ④改良马丁琼脂培养基 ⑤营养琼脂培养基 ⑥PH7.0 氯化钠-蛋白胨缓冲液 ⑦营养肉汤培养基 验证用菌株： 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)[CMCC(B) 26003] 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B) 63501] 生孢梭菌(Clostridium sporogenes)[CMCC(B) 64941] 白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F) 98001] 无菌检验仪器及相关设备压力蒸汽灭菌器 型号： 生产厂家： 校验日期： 有效 期： 生化培养箱 型号： 生产厂家： 校验日期： 有效 期： 电热培养箱 型号： 生产厂家： 校验日期： 有效 期： 超净操作台 型号： 生产厂家： 校验日期： 有效 期： 6.2 验证时间 质控部提起草验证方案，经批准后实施，整个验证活动按下面时间安排完成。 年 月 日 至 年 月 日。 验证依据 《中国药典》2010 年版附录无菌检查法。 验证内容总则： A、对照组按照现有方法进行检测。 B、验证组按照中国药典 2010 版中无菌检查法进行检测。 C、将两组试验结果进行对比、分析和评价，并作出验证结论。8.1.培养基无菌性检查 8.1.1.取每管装量不少于 50ml 的硫乙醇酸盐流体培养基 5 支、每管装量不少于 50ml 的改良马丁培养基 5 支，置规定温度下培养 14 天。 8.1.2 应无菌生长。 试验菌液的制备 接种金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至 10ml 营养琼脂培养基中,置 30~35℃培养 18~24 小时，分别取上述培养物 1ml 加 9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液 10 倍递增稀释制成每 1ml 含菌数小于 100 CFU 的菌悬液。 接种生孢梭菌的新鲜培养物至 12ml 硫乙醇酸盐流体培养基中,30～35℃培养 18～24 小时，取上述培养物1ml 加 9ml0.9%无菌氯化钠溶液 10 倍递增稀释制成每 1ml 含菌数小于 100 CFU 的菌悬液。 接种白色念珠菌的新鲜培养物至 10ml 改良马丁琼脂培养基中，置 23~28℃培养 24~48 小时，取上述培养物 1ml 加 9ml 0.9％的无菌氯化钠溶液 10 倍递增稀释制成每1ml 含菌数小于 100CFU 的菌悬液。 供试液的制备 ◆稀释剂：pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 ◆医疗器具：取供试品置无菌容器中，按照每单件供试品加稀释剂 50~100ml 的量将供试品进行冲洗，振荡浸提 1h，作为供试液。 方法验证 采用薄膜过滤法。 将上述供试液按薄膜过滤法过滤，冲洗。在最后的冲洗液 （100mlPH7.0 氯化钠-蛋白胨缓冲液）中加入小于100cfu 的试验菌， 过滤。取出滤膜分别接种至 50ml 硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基中。另取一装有同体积培养基的容器，加入等量的试验菌，作为对照。各试验菌同法操作。 ◆培养条件：硫乙醇酸盐流体培养基 30~35℃ 3 天； 改良马丁培养基 23~28℃ 5 天。 结果判断 与对照管