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春季回填时上下土层颠倒?—1 图 不同土层真菌数量的差异 春季回填时上下土层颠倒?—2 原位回填 土层置换 A1 A3(原下层) A2(原上层) 单向分析:(最后一次与冬前相比) A1: 9月份比冬前都低,栖霞低36%;蒙阴相近;莱州低48%。 A2: 9月份比冬前都低,栖霞低60%;蒙阴低85%;莱州低19%。 A3: 栖霞9月比冬前低23%;蒙阴比冬前高57%;莱州比冬前高27.2%。 月份之间各处理比较: 9月 A3比A1:栖霞低12%;蒙阴低23.1%;莱州高40.3%; A2比A1:栖霞低37%;蒙阴低84%;莱州相近; A3比A2:栖霞高10.6%;蒙阴高25.6%;莱州高14.4%; 7月 A3比A1:栖霞低17.7%;蒙阴相近;莱州高25%; A2比A1:栖霞高16%;蒙阴相近;莱州高53.5%; A3比A2:栖霞低30.8%;蒙阴相近;莱州低53.5%; 5月 A3比A1:栖霞相近;蒙阴低37%;莱州低37.2%; A2比A1:栖霞高70%;蒙阴低28.7%;莱州相近; A3比A2:栖霞低35%;蒙阴相近;莱州低43%。 2、栽植前树穴土用防治连作障碍专用菌肥或用多菌灵处理 定植沟内挖40cm见方的树穴,将2kg防治苹果连作障碍专用菌肥与穴土充分混匀。 或者,在定植前一个月将40克多菌灵(有效成分80%)和40克磷酸一铵与40cm见方的穴土充分混匀。 选根系良好的大苗、整齐苗定植(提倡选用自根苗)。 A 树穴土壤接种防治苹果连作障碍专用菌肥 菌肥包括5株菌: BJS-1- 3, Y-1、T6-1、 9-PW12、10-K24 筛选出海藻肥做载体, 5株菌剂与海藻肥混匀,得到苹专2号。 菌剂筛选过程:酚酸类物质降解菌的筛选 苹果根际酚酸类物质降解菌的分离与降解能力、底物特异性测定 利用苯甲酸降解菌驯化培养基:8份土壤样品→分离获得19株苯甲酸降解细菌→苯甲酸降解率在11.65%~65.31%之间,其中以BJS-1-3、BJS-1-5、BJS-3-3和BJS-3-4的降解效果较好,降解率达58.23%~65.31%→选其进行底物特异性试验→分别以阿魏酸、对羟基苯甲酸、香草醛、水杨酸和肉桂酸为唯一碳源对上述4株菌进行底物特异性试验,其中BJS-1-3能利用除水杨酸之外的四种酚酸 。 菌名 阿魏酸 对羟基苯甲酸 香草醛 水杨酸 肉桂酸 BJS-1-3 BJS-1-5 BJS-3-3 BJS-3-4 + + + - + - + + + - - - - - - - + + + - 将研究获得的25个菌株进行双抗药性筛选,获得双抗标记菌株→灌根与回收→获得10株在苹果根际稳定定殖的菌株(固氮菌10-N9;解无机磷细菌9-PW12、2-PW13;解钾细菌10-K24、9-K2;酚酸类物质降解菌BJS-1-3、BJS-3-3;拮抗菌Y-1、T5-1、T6-1。 菌株 Strains 菌落数/cfu·g-1(干土) 5d 10d 20d 30d 10-N9 6.54×105 6.26×104 3.67×104 3.58×104 9-PW12 2.46×105 7.08×104 3.45×104 3.25×104 2-PW13 3.54×105 5.28×104 3.26×104 3.00×104 10-K24 6.54×106 2.68×106 5.30×105 4.50×105 9-K2 3.58×105 7.25×104 5.26×104 4.80×104 BJS-1-3 4.26×105 1.26×105 7.12×104 6.50×104 BJS-3-3 5.48×105 2.45×105 6.65×104 5.20×104 Y-1 1.34×105 7.38×104 4.05×104 3.35×104 T5-1 3.56×105 8.34×104 4.85×104 4.33×104 T6-1 5.44×105 7.68×104 4.75×104 4.73×104 菌剂筛选过程:相关菌株在苹果根际及体内的定殖试验 对上述10株菌两两划线进行拮抗试验,结果:2-PW13、BJS-3-3与T6-1有拮抗现象,9-K2与Y-1有拮抗现象,其余互不拮抗。因此选择10-N9、9-PW12、10-K24、BJS-1-3、 Y-1和T6-1作为后续菌株继续进行试验。 菌 株 10-N9 9-PW12 2-PW13 10-K24 9-K2 BJS-1-3 BJS-3-3 Y-1 T5-1 T6-1 10-N9 - 9-PW12 - - 2-PW13 - - - 10-K24 - - - - 9-K2 - - - - - BJS-1-3 - - - - - -
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