小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性.docVIP

小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性 文档信息 ： 文档作为关于“医学心理学”中“针灸学”的参考范文，为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文6457字，doc格式，可编辑。质优实惠，欢迎下载！ 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性 2 一、资料与办法 2 1.1样原本源 2 1.2试剂及仪器 2 1.3菌株的别离培育 3 1.4生物分型及血清分型 3 二、后果 4 2.1标本检出状况 4 2.2生物分型及血清学分型后果 4 2.3毒力基因检测状况 4 三、讨论 4 文2：小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性 5 1材料与方法 6 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性 文1：小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性 耶尔森菌(Yeiniaenterocolitica)是一种人兽共患性、食源性病原菌，可在冷藏温度下生长，普遍存在于自然界各种植物宿主[1-2]，包括牲畜、家禽、啮齿植物、匍匐植物和水生植物等，其中猪、犬、牛等宿主与人群感染有重要关系，其可惹起胃肠道症状、呼吸零碎、心血管零碎和骨骼结缔组织等部分组织或全身性疾患[3]。20世纪80年代中期，兰州[4]和沈阳市发作小肠结肠炎耶尔森菌盛行，感染病例达500例，惹起高度关注。2013年登封市扩展对腹泻患者、牲畜和家禽等监测范围，尤其是对屠宰场猪咽拭子、肛内容物及食品等监测范围。对别离出的小肠结肠炎耶尔森菌停止生物化学鉴定、血清学分型及PCR扩增毒力基因等，理解小肠结肠炎耶尔森菌的生物学特性及宿主散布特征，爲预防控制小肠结肠炎耶尔森菌感染提供迷信根据。 一、资料与办法 1.1样原本源 2013年在登封市共采集各类标本1138份。其中，在腹泻监测点采集腹泻患者粪便569份;在各乡镇采集牲畜、家禽粪便标本32份;在定点生猪屠宰场，用已消毒的棉拭子(特制加长)采集刚屠宰后生猪咽拭子及肛内容物394份;采集市场待售肉制品143份。 1.2试剂及仪器 小肠结肠炎耶尔森菌选择性培育基和配套抗生素爲美国BD公司产品，0.1mol/L磷酸盐缓冲溶液(pH7.4，改进PBS)、克氏双糖铁琼脂(KIA)、动力吲哚尿素培育基(MIU)均购自上海市疾病预防控制中心(CDC)，哥伦比亚养分琼脂购自英国Oxoid公司。小肠结肠炎耶尔森菌分型血清购自日本生研株式会社(包括O∶1、O∶2、O∶3、O∶5、O∶8和O∶9型)，菌株鉴定用的API20E生化板条及配套试剂均购自法国生物梅里埃公司，PCR扩增相关试剂及引物分解来自生工生物工程(上海)股份无限公司。PCR热循环仪、电泳仪、琼脂糖凝胶电泳成像仪均爲美国Bio#8259;Bad公司产品。PCR扩增用Premix、2000bpDNALadder(DL2000)均购自TaKaRa公司。 1.3菌株的别离培育 将采集标本于4℃冷增菌培育，辨别于7、14、21d后转种于小肠结肠炎耶尔森菌选择性培育基，25℃培育24～36h，挑取疑似菌落转种于克氏双糖斜面25℃培育24h，选择克氏双糖+/+、不产气、H2S-，接种于尿素培育基及半固体培育基，选择尿素酶+、25℃培育动力+、37℃培育动力-，镜检爲革兰阴性杆菌或椭圆或球杆菌细菌，运用API20E肠道菌生化鉴定板条停止菌种鉴定[5-7] 1.4生物分型及血清分型 生化反响是小肠结肠炎耶尔森菌鉴定的次要根据，同时将检测后果作爲生物分型的根据。详细参照文献[3]停止。对鉴定后果爲小肠结肠炎耶尔森菌的菌株参照文献[8]停止血清学分型，设盐水对照。1.5PCR检测借助PCR检测技术对小肠结肠炎耶尔森菌黏附侵袭点基因(ail)、耐热性肠毒素基因(ystA)、生物1A型携带的肠毒素基因(ystB)、黏附素(yadA)、yop调理子转录活化作用因子(virF)等停止检测。PCR产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳别离(170V，30min)，引物序列参照文献[9]停止。携带ail+、ystA+、yadA+、virF+、ail+或ystA+等基因的菌株爲致病性菌株，携带ystB+、ail-、ystA-、ystB-、yadA-、virF-基因的菌株爲非致病性菌株。 二、后果 2.1标本检出状况 2013年采集人、植物宿主粪便、猪咽拭子、猪肛拭子及食品标本共1138份，小肠结肠炎耶尔森菌总检出率爲14.85%(169/1138)。腹泻患者、犬、鸡粪便的小肠结肠炎耶尔森菌检出率辨别爲0.70%(4/569)、50.00%(2/4)和13.33%(2/15);猪咽拭子及肛内容物小肠结肠炎耶尔森菌的检出率