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缓冲溶液的配制与性质实验报告
篇一:《缓冲溶液的配制与性质》
实验一缓冲溶液的配制和性质、溶液ph值测定
【实验目的】
1.2.3.4.5.
学习缓冲溶液及常用等渗磷酸盐缓冲溶液的配制方法。 加深对缓冲溶液性质的理解。强化吸量管的使用方法。学习 使用phs-2c型酸度计。培养环境保护意识。
【预习作业】
1. 一般性溶液与缓冲溶液有什么不同? 2.缓冲溶液的 性质有哪些?
3.如何衡量缓冲溶液的缓冲能力大小?缓冲溶液的缓 冲能力与什么因素有关? 4.实验是如何设计以验证缓冲溶 液所具有的性质及缓冲容量的影响因素的,设计时有哪些注 意事项?
5.该如何检测缓冲溶液的ph值是否发生改变?是否均
需要用ph计? 6.本实验属定量测定还是定性测定或半定量 测定?
【实验原理】
普通溶液不具备抗酸、抗碱、抗稀释作用。缓冲溶液通 常是由足够浓度的弱酸及其共轭碱、弱碱及其共轭酸或多元 酸的酸式盐及其次级盐组成的,具有抵抗外加的少量强酸或 强碱、或适当稀释而保持溶液ph值基本不变的作用。
本实验通过将普通溶液和配制成的缓冲溶液对加入酸、 碱或适当稀释前后ph数值的变化来探讨缓冲溶液的性质。
根据缓冲溶液中共轭酸碱对所存在的质子转移平衡:
hb?b+h3o+
缓冲
溶液ph值的计算公式为:
ph?pKa?lg
[b][hb]
?pKa?lg
[共轭碱H共轭酸]
?pKa?lg缓冲比
式中pKa为共轭酸解离常数的负对数。此式表明:缓冲
溶液的ph值主要取决于弱酸的pKa值,其次决定于其缓冲 比。
需注意的是,由上述公式算得的ph值是近似的,准确 的计算应该用活度而不应该用浓度。要配制准确ph值的缓 冲溶液,可参考有关手册和参考书上的配方,它们的ph值 是由精确的实验方法确定的。
缓冲容量(B)是衡量缓冲能力大小的尺度。缓冲容量 (B)的大小与缓冲溶液总浓度、缓冲组分的比值有关。
8=2.303
[hb]X[b][b]X=2.303X-
1 +缓冲比[hb] + [b]
缓冲溶液总浓度越大则B越大;缓冲比越趋向于1,则B 越大,当缓冲比为1时,B达极大值。
实验室中最简单的测定缓冲容量的方法是利用酸碱指 示剂变色来进行判断的。例如:本
实验就使用了甲基红指示剂。
表2-3-1甲基红指示剂变色范围
ph值颜色
4.2红色
4.2?6.3橙色
6.3黄色
医学上常用pbs(等渗磷酸盐缓冲盐水)作为体外细胞缓 冲培养液。pbs是与人体血浆渗透压(280?320mosmol ?LT) 等渗,并与人体血液ph值(7.35-7.45) 一致的含有nacl Kcl、na2hpo4、Kh2po4等物质的磷酸盐缓冲液。根据不同用 途,pbs有不同的配制方法,如用于细胞培养的pbs配方为: 8gnacl, 0.2gKcl, 0.24gKh2po4, 1.44gna2hpo4,加水至 800ml, 用hcl调ph至7.4,补水至1L,消毒灭菌既得。
其在水溶液中的质子转移平衡如下:
h2po4 + h2o?h2po42 + h3o+Ka2
由上式可知该缓冲液ph的计算公式为
ph?pKa?lg
[共轭碱H共轭酸]
?pKa2?lg
[hpo4][Kh2po]
-42-
该公式计算出来的数值由于未考虑溶液的活度,所以所 得的数值仍为近似值。
【仪器与试剂】
仪器:吸量管(5mLX5, 10mLX5),比色管(20mLX4), 量筒(10mL),烧杯(50mLX6),试管(10mLX6, 20mLX6),
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滴管,玻棒,洗瓶,phs-2c型酸度计等
试剂:l.Omol ?LThAc, 0.1mol ?LThAc, 1.0mol ?LTnaAc,
0.10mol ? L-1naAc, 0.15mol ? L-1Kh2po4,
0.10mol ?L—1na2hpo4, 0.15mol ?L—1nacl, 0.15mol ?L—1Kcl, 1.0mol ? L—1naoh, 1.0mol ? L—1hcl, 0.15mol ? L—1hcl, 蒸 馏水,甲基红指示剂,广泛ph试纸,自带试样两份
【实验步骤】(方法1)
一、 缓冲溶液的配制
按照表2-3-2中用量,用吸量管配制甲、乙、丙及细胞 培养用pbs缓冲溶液于已标号的四支10mL,20mL比色管中, 备用。
二、 缓冲溶液的性质
缓冲溶液的抗酸、抗碱、抗稀释作用
取7支试管,按表2-3-3分别加入下列溶液,用广泛ph 试纸测ph值。然后,分别在各试管中滴加2滴1mol?L-1hcl 溶液或2滴1mol ? L—1naoh溶液,再测ph值。记录实验数 据:解释所得结果。
缓冲容量与缓冲溶液总浓度(c)及缓冲比
[b][hb]
的关系
取6支试管,按表2-3
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