《豆芽中6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、N6-异戊烯腺嘌呤的快速检测 拉曼光谱法》-全文及说明.docxVIP

PAGE 6 PAGE 1 豆芽中6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、 豆芽中6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、N6-异戊烯腺嘌呤的快速检测 拉曼光谱法 Rapid determination of 6-Benzylaminopurine、6-furfuryladenine and N6-(delta 2-Isopentenyl)-adenine residues in bean sprout by Raman spectroscopy 团体标准 I ICS 67.080. CCS T/FJBR 000-2021 PAGE 2 T/FJBR 000 -2022 PAGE 1 豆芽中6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、N6-异戊烯腺嘌呤的快速检测 拉曼光谱法 1 范围 本标准规定了使用便携式拉曼光谱仪检测豆芽中6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、N6-异戊烯腺嘌呤的方法。 本标准适用于绿豆芽、黄豆芽等各种芽菜类产品中6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、N6-异戊烯腺嘌呤的筛选检测。 本方法测定豆芽中6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、N6-异戊烯腺嘌呤的检出限为50 μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682—2008 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 40219-2021 拉曼光谱仪通用规范 3 术语和定义 GB/T 40219—2021 规定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 通常，不同物质具有与其分子结构相对应的特征拉曼（Raman）光谱。当引入具有表面增强拉曼光谱（简称SERS）效应的纳米增强试剂时，物质的拉曼信号将得到显著性增强。取适量粉碎后的豆芽样品，经溶剂提取、净化与富集，加表面增强拉曼光谱（简称SERS）增强试剂有效增强目标物的拉曼信号，进行拉曼光谱扫描。根据6-苄氨基嘌呤、6-糠氨基嘌呤、N6-异戊烯腺嘌呤的拉曼特征谱峰（参见附录A）进行结果判定：有特征峰出现为阳性，否则为阴性或含量低于检出限。 5 试剂和材料 除另有规定，所用试剂均为分析纯，SERS增强试剂合成用水应符合GB/T 6682-2008中的一级要求，其他实验用水应符合GB/T 6682—2008中一二级水要求，具体试剂与材料如下： 二氯甲烷(CH2Cl2）； 盐酸（HCl）； 盐酸溶液（0.1 mol/L）：量取浓盐酸9mL，倒入预先盛有适量水的试剂瓶中，加水定容至1000 mL； 氯金酸（AuCl3·HCl·4H2O）； 氯金酸溶液（0.01%）：取0.10 g氯金酸加水（一级水）定容至1L； 柠檬酸三钠（Na3C6H5O7）； 柠檬酸三钠（1 %）：取1g柠檬酸三钠加水（一级水）定容至100 mL； 无水硫酸钠（Na2SO4）； SERS增强试剂：纳米金浓缩液，或相当者；纳米金溶胶：取100 mL 0.01%氯金酸（AuCl3·HCl·4H2O）水溶液加热至沸，剧烈搅拌下准确加入1.0 mL 1%柠檬酸三钠（Na3C6H5O7）水溶液，金黄色的氯金酸水溶液在2 min内变为红色，煮沸1h，冷却至室温。取1.5mL纳米金溶胶于1.5mL离心管中，采用高档转速离心5min，弃去上清液，吸取底层红褐色浓缩液体50 μL，即为纳米金浓缩液。 6-苄氨基嘌呤标准品（6-Benzylaminopurine，CAS# 1214-39-7，C12H11N5，纯度≥99%） 6-糠氨基嘌呤标准品（6-furfuryladenine，CAS# 525-79-1，C10H9N5O，纯度≥99%） N6-异戊烯腺嘌呤标准品（N6-(delta 2-Isopentenyl)-adenine，CAS#2365-40-4，C10H13N5，纯度≥99%） 6-苄氨基嘌呤标准工作液（10 μg/mL）：取1 mL浓度为1000 μg/mL的6-苄氨基嘌呤标准品于100 mL容量瓶中，用二次水稀释至刻度，摇匀，制成浓度为10 μg/mL的标准工作液。于4 oC避光保存，有效期一个月； 6-糠氨基嘌呤标准工作液（10 μg/mL）：取1 mL浓度为1000 μg/mL的6-糠氨基嘌呤标准品于100 mL容量瓶中，用二次水稀释至刻度，摇匀，制成浓度为10 μg/mL的标准工作液。于4 oC避光保存，有效期一个月； N6-异戊烯腺嘌标准工作液（10 μg/mL）：取1 mL浓度为1000 μg/mL的N6-异戊烯腺嘌标