微生物的生长繁殖与生存因子.pptVIP

5.2.7 表面张力γ γ —— 是作用在物体表面单位长度上的收缩力 γ(H2O)＝7.3×10－4 N/m γ(培养基)＝4.5×10－4～6.5×10－4N/m 胆汁可降低γ，可用于实验鉴别肺炎球菌和链球菌 可用胆酸盐分离大肠菌群 5.3 其它不利环境因子对微生物的影响 5.3.1 紫外辐射和电离辐射对微生物的影响 一、 紫外辐射的影响 1. 紫外辐射对微生物有致死作用 λ＝260nm左右的紫外辐射杀菌力最强 致死原因： 微生物细胞中的核酸、蛋白质等对紫外辐射有特别强的吸收能力，可引起DNA链上的两个邻近的胸腺嘧啶分子形成胸腺嘧啶二聚体(T=T)，使DNA不能复制，导致死亡。 2. 复活现象 光复活 —— 经UV照射的微生物，随即暴露于蓝色可见光下，使T=T恢复正常状态，使一部分受损的细胞恢复活力。 暗复活 —— DNA链在黑暗条件下进行修复。 3. 微生物对紫外辐射的抵抗力 G＋＞G－ 芽孢＞营养细胞 4. 应用 杀菌消毒 诱变育种 1. 测定微生物的总数(直接计数法) ② 涂片染色法 1视野菌液(ml)＝(0.01ml ／1cm2)×视野面积(cm2) 1. 测定微生物的总数(直接计数法)③ 比例计数法 比例——样品菌液与等体积的血液混合，观测二者比例 提问：如果平均每个视野中细菌数量/红血球的数量比例为5.5：1，则细菌数量=？ 5.5×400万个/m l =2.2×107个/mL样品 红血球数已知(男性400~500万个／ml，女性350~450万个／ml)，平均400万个/ml 细菌 红血球 1. 测定微生物的总数(直接计数法) ④ 比浊计数法 浊——细菌悬浮液的浊度 细菌不完全透光，一定范围内细菌溶液的混浊度与细菌数量成正比 常用仪器：浊度计、分光光度计 一、 细胞数目的测定 2. 测定活菌数(间接计数法) ① 载玻片薄琼脂层培养计数 ② 平板菌落计数 ③ 液体稀释培养计数 ④ 薄膜过滤计数 无菌水 2. 活菌计数法(间接计数法) 平板菌落计数法 第一步：菌样巧妙稀释 得到不同稀释度 （10-x）菌液 菌样被无菌水不同稀释倍率后平板培养图 10 - 2 10 -3 10 -4 10 -5 各取1ml，均匀涂布于冷固体培养基平板上或与温热液态固体培养基混合冷却。 第三步：培养 稀释度过低，菌落密集无法计数 可以计数，但数量过多，费时费力 数量合适，统计计算，作为结果 数量太少，误差因素太大，不做计数 第二步：接种平板 每一个细菌会生成一个菌落 一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜。 第四步： 计数 细菌数量=？ 细菌数量=数出的菌落数/稀释度 例如：10-5稀释度时菌落数为125个 细菌数量=125/10-5=1.25×107个/mL 平板计数法是采用最广的一种活菌计数法 平均 二、 微生物生物量的测定 ① 测细胞干重法 ② 含N量测定法 ③ DNA测定法 ④ 生理指标法 5.2 微生物的生长因子 5.2.1 温度 1. 温度对微生物的影响具体表现在： 影响酶活性。温度变化影响酶促反应速率，最终影响细胞合成。 影响细胞膜的流动性。温度高，流动性大，有利于物质的运输；温度低，流动性降低，不利于物质运输，因此，温度变化影响营养物质的吸收与代谢产物的分泌。 影响物质的溶解度。对生长有影响。 2.微生物按温度需求分类 3.各类微生物生长的适宜温度 微生物 最低温度 ℃ 最适温度 ℃ 最高温度 ℃ 嗜冷菌 －5～0 5～10 20～30 嗜中温菌 5～10 25～40 45～50 嗜热菌 30 50～60 70～80 嗜超热菌 55℃以上 70～105 110～113 微生物 原生动物 放线菌 霉菌 藻类 废水生物处理中的微生物 适宜温度 ℃ 16～25 23～37 23～37 28～30 30左右 4.嗜冷微生物在低温下生长的机理 ①它们体内的酶能在低温下有效地催化，在高温下酶活性丧失 ② 主动运输物质的功能良好，能有效地集中必需营养物 ③细胞膜中的不饱和脂肪酸含量高，低温下也能保持半流动状态，可以进行物质的传递 5.低温对微生物的影响 当环境温度低于微生物的最适生长温度时，微生物的代谢极其微弱，基本处于休眠状态，当微生物的原生质结构并未破坏时，不会很快造成死亡并能在较长时间