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一、显微镜
二、不染色细菌标本的检查
三、细菌染色标本的检查
(一)常用染料
(二)常用的染色方法
不染色标本的检查
观察生活状态下细菌的动力及运动状况。
压滴法和悬滴法,?以普通光学显微镜观察,用暗视野显微镜或相差显微镜观察,则效果更好。
螺旋体由于不易着色并有形态特征,故多用不染色标本作暗视野显微镜检查。
细菌染色标本的检查
观察细菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构、异染颗粒等。
革兰染色法:革兰阳性/阴性细菌
抗酸染色法:结核抗酸杆菌
墨汁染色法:新型隐球菌
荧光染色法
鞭毛染色/芽孢染色
常用染料
多为人工合成的含苯环的有机化合物
1.碱性染料?:细菌在碱性、中性、弱酸性的环境中细菌均带负电荷,易与带正电荷的染料结合而着色。常用的碱性染料有碱性复红、结晶紫、亚甲蓝等。
2.酸性染料:常用来染细胞浆,很少用于细菌的染色。常用的有伊红、刚果红等。
3.复合染料(中性染料):如瑞氏染料(伊红亚甲蓝)、吉姆萨染料(伊红天青)等。
4.荧光染料:常用异硫氢基荧光素。
常用染色方法
革兰染色:细菌学中最经典、最常用的染色方法。
结果:紫色——G+
红色——G-
原理:细胞壁结构不同
意义:鉴定细菌
初步诊断
药物选择
细菌染色的基本程序:
涂片(干燥)→固定→初染→染色(媒染)→(脱色)→(复染)
结晶紫-碘液-乙醇-稀释复红
抗酸染色:
原理:分枝杆菌细胞壁特点
方法:初染(石炭酸复红)→固定(加热)→脱色(5%盐酸酒精)→复染(碱性美蓝)
结果:红色——抗酸细菌
蓝色——非抗酸细菌
意义:鉴定分枝杆菌
荧光染色:
结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。
鞭毛染色:观察菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量。
异染颗粒染色:白喉棒状杆菌感染检测。
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