02_LCMS8050方法编辑操作步骤V2.docVIP

LCMS-8050方法编辑操作步骤 打开实时分析窗口—鼠标左键单击需要使用的仪器配置类型 联机成功后听到“嘀”一声，界面显示如下，LC和MS应显示为“Ready” 3．新建文件存储路径 点击数据管理器窗口右上角的“Select Project(Folder)”图标（若数据管理器窗口没有出现，请点击工具栏中的“Toggle Data Exploror”图标） 文件存储路径为树状结构，下图蓝色标记的文件夹即为选中的文件夹，若需要重新建立新的文件夹，可以先选择路径，再点击下图中“New Folder”，新文件夹会自动建立在所选路径下，文件夹名称可根据项目要求自行输入，复选框中“Method Files”、“Report Format Files”、“Batch Files”默认为选中状态，表示将当前文件夹下的这些文件均复制到新建立的文件夹中，如果想建立完全空的文件夹，可以将复选框中的“√”去掉。 请将上图中select project 和 toggle data exploror 标注互换 请将上图中select project 和 toggle data exploror 标注互换 4．创建新方法 鼠标左键单击“New Method File”，单击“Save”图标，在弹出的对话框中输入方法文件名，方法文件的保存路径默认为当前文件夹，如果需要更换文件夹，“保存”在对应的下拉菜单中可以进行更改。 5．MRM方法的建立 定量工作一般采用MRM模式，对于目标化合物首先需要建立化合物的MRM分析方法。 注：MRM参数与分离条件无关，优化好的MRM方法可以在不同分析方法中使用。 Q1/Q3 扫描 配制一定浓度（例如100 μg/L）的目标化合物单标或者混标，通过自动进样器进样（例如1 μL），采用FIA模式，进行Q1/Q3扫描寻找目标物质的母离子，可正负离子同时扫描，添加负离子扫描事件时，选中“Negative”，鼠标左键单击Scan（-），即可自动添加负离子扫描事件。在扫描条件设置中根据目标化合物的分子量设置合适的“Start m/z”和“End m/z”，同时“Event Time”设置为0.2 sec，“Acq. Time”修改为0-0.5min 扫描分析时“Interface”参数可采用默认参数，不需要修改 分析时间“Data Acquisition”设置为0.5 min “Time Program”不进行设置 “Pump”部分选择“Binary gradient”，“Total Flow”0.4 mL/min，“Pump B Conc.”80% “Column Oven”前的“√”去掉 “Autosampler”将Rinse Type改为“off（Fast LC）” 将以上条件设置好后，保存方法，鼠标左键点击快捷键“”，然后鼠标左键按“Download”键。 单针/批处理进样分析。 数据结果查察看 打开Postrun的“再解析”窗口，打开数据文件，使用“Average Spectrum”工具，查看某段时间内的平均质谱图，找到目标化合物的[M+H]+或者[M-H]-及加合离子信息，根据分析结果选择合适的母离子。 上图中“ 上图中“前提离子”改为“前体离子” 使用软件自动优化产物离子及MRM参数 鼠标左键单击“Optimization for Method”，弹出的对话框中选择“Search product ion and optimize MRM”作为优化方式，点击“下一步”。 在弹出的对话框中依次输入“Compound Name”、“Precursor m/z”、“End(min)”、“Vial” 、“Tray”、“Inj Vol.”等信息。 “Compound Name”为目标化合物名称 “Precursor m/z”为目标化合物对应的前体离子 “End(min)”设为0.5 min “Vial”为样品瓶放置的孔位 “Tray”为样品瓶放置的样品架架号 “Inj Vol.”为进样体积，通常采用1.0 μL 前体离子和产物离子质量数“ 前体离子和产物离子质量数“校准”建议改为“优化”。 优化结果的存储路径为“Output Folder”中所显示的文件夹，可对文件夹名字进行修改。 其他条件采用默认即可，不必进行修改。 可以同时进行多个化合物的优化，只需要在列表中依次选中“Target”，编辑相应行的内容即可。 完成以上编辑，鼠标左键点击“Start”，开始MRM优化过程。 注：“采用这种方式完成一个化合物的MRM优化需要5步，通常4分钟内可以完成一个化合物的优化，若时间过长，建议Stop整个优化过程，检查End(min)是否修改为0.5 min（默认为10 min）。 产物离子扫描 如果需要目标化合物的产物离子扫描图，或者采用自动