HPLC分析方法开发汇总篇.pdf

HPLC 分析方法开发汇总篇 各位亲爱的小伙伴， HPLC 分析方法开发专题终于完成了！！现将 专题内的文章进行 总和总结，希望能够帮到大家 ！！ 1、明确分析 目的，搜集样品相关信息 1.1 目标确认与准备 阅读该文 ➡️ 1.1 目标确认与准备 1.2 样品需要搜集哪些相关信息 阅读该文 ➡️ 1.2 样品需要搜集哪些相关信息 总结：在分析方法开发之前我们一定要与合成人员沟通他们的检测需 求和样品相关信息，明确检测 目的和相关信息后方可进行对应的方法 开发，磨刀不误砍柴工 ！ 2、根据样品性质，选择合适的预处理方案 2.样品预处理导论篇 阅读该文 ➡️ 2 、样品预处理 （1 ） 2.1 固体与半固体样品预处理 阅读该文 ➡️ 2.样品预处理 （2 ） 2.2 液体样品处理 阅读该文 ➡️ 2.样品预处理 （3 ） 2.3 衍生化 阅读该文 ➡️ 2.样品预处理 （4 ） 总结：样品预处理总的原则为除去干扰物质使样品相对纯净、不损伤 色谱柱并且能很好的与 HPLC 兼容并且能真实反映样品特性对检测结 果准确度无影响。 3、选择仪器类型并确定检测器类型 3.1 UV 检测器 阅读该文 ➡️ 3.检测器选择 （1） 3.2 其他 HPLC 检测器 阅读该文 ➡️ 3.检测器选择 （2） 总结：检测器的选择主要结合 目标物的结构特性来选择，关注各检测 器灵敏度。 4 、色谱条件粗选 （色谱柱、流动相、波长等） 4.1 液相色谱柱 阅读该文 ➡️ 4.1 液相色谱柱选择与维护 4.2 HPLC 反相色谱条件选择 阅读该文 ➡️ 4.2HPLC 反相色谱条件建立 4.3 HPLC 正相色谱条件选择 阅读该文 ➡️ 4.3 HPLC 正相色谱条件选择 总结：根据色谱理论确定大致初选条件方向，然后从常规条件开始试 方法。 5、色谱条件优化 （峰形、分离度、灵敏度等） 阅读该文 ➡️ 5.HPLC 色谱条件优化 总结：根据实验结果中出现的峰形及分离度问题，制定针对性的优化 方案。 6、分析方法预验证与验证 6.1 分析方法验证内容 阅读该文 ➡️ 6.1 分析方法验证内容 6.2 分析方法验证案例分享 阅读该文 ➡️ 6.2 分析方法验证实例 总结：根据不同的测试项 目和测试范围制定合适的验证方案并进行方 法学验证，确保分析方法准确有效。 7、计算方式选择 （面积归一、外标、内标等） 阅读该文 ➡️ 7.色谱定量方法选择 总结：根据方法学验证相关校正因子的数值，选择能准确反映检测结 果的计算方式，通常情况下相关校正因子在 0.9-1.1 之间的可以不加 校正因子直接计算。 8 、质量标准制定 阅读该文 ➡️ 8.质量标准的制定 总结 ：结合各大指导原则、质量研究数据以及产品自身特性制定质量 标准，根据中试、试生产数据修订质量标准，最终确定质量标准。质 量标准务必确保产品安全、有效、质量可控。 1、明确分析 目的 ，了解样品相关信息 （1 ） 1.1 目标确认与准备 Part 1:分析 目标考虑因素 1 明确检测项 定量分析？检出某种物质？未知物的确定？纯化制备？光谱鉴定？ 2 需要分离化合物的复杂程度 是否一种条件能将所有组分分开？一种条件有困难？分组分析？如何 分组？ 3 定量分析的准确度和精密度 需要根据准确度和精密的要求选择合适的仪器配制等 4 不同样品基质对分离的影响 如原料药、粗品、精品、残留、环境样品等，不同的样品对应的处理 方法。 5 分析的工作量，少数还是大量 根据分析工作量制定分析计划，并衡量时间和效率与分离的选择。 6 实验室的条件是否具备 包括 HPLC 仪器的配置、色谱柱系统、是否有恒温、是否可以做梯 度、分析成本、实验室人员的操作技能、方法转移等等。 Part2:准备工作 一般明确分析 目标，搜集 目标物和样品相关信息后，就确定了大致 方向。通常会从以下两条路去确定初步分离条件： 1， 根据过往经验直接选定初始分离条件 这个主要依赖之前做过的类似化合物分离条件，分析样品性质， 前处理后直接套用之前的色谱分离条件。 2 ， 文献查