大肠菌群计数.pptVIP

什么样的菌落必须要做证实试验? 一是非典型菌落，如在颜色、直径与典型菌落不符合的菌落。 另一种情况是被检样品中含有乳糖以外的其他糖类，如牛奶、饮料等样品。本来大肠菌群的定义是发酵乳糖，但由于样品含有的其他糖类混入了培养基，使得不能分解乳糖但能分解其他糖类的细菌也能够长出红色菌落，所以需要进行证实实验。 结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA) VRBA的主要成分：乳糖、胆盐、结晶紫、中性红及细菌生长所必需的营养成分如:蛋白胨、酵母膏等。 结晶紫和中性红为VRBA的指示剂系统，在酸性条件下为紫红色。 大肠菌群分解乳糖所产生的酸与胆盐结合，可形成沉淀。 第三法 大肠菌群PetrifilmTM测试片法 大肠菌群PetrifilmTM测试片法原理 PetrifilmTM大肠菌群测试片是一种预先制备好的培养基系统，含有VRB 培养基，冷水可溶性凝胶和TTC指示剂，可增强菌落计数效果。表面覆盖的胶膜，可截留发酵乳糖的大肠菌群产生的气体。培养结束后计数红点周围有气泡的菌落为大肠菌群数。 大肠菌群PetrifilmTM测试片检验程序 检样25g(ml)+225ml稀释液，均质 10倍系列稀释 选择2~3个适宜稀释度的样液， 接种PetrifilmTM大肠菌群测试纸片 计数红色带气泡菌落 报告结果 36℃±1℃ 24±2h 操作要点 按第一法的样品制备方法进行。 样品匀液