核酸的降解和核苷酸代谢.pptVIP

第一页，共三十七页，2022年，8月28日 核酸酶实质是磷酸二脂酶。 根据酶对底物的专一性分为：核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、非特异性核酸酶。 根据酶的作用方式分：内切酶、外切酶。 第一节 核酸的酶促降解 核酸酶 核酸 核苷酸 3’、5’-磷酸二酯键 第二页，共三十七页，2022年，8月28日 一、?? 核糖核酸酶 只水解RNA磷酸二酯键的酶（RNase），不同的 RNase专一性不同。 牛胰核糖核酸酶I（RNaseI），作用位点是嘧啶核苷-3’-磷酸与其它核苷酸间的连接键。 （内切核酸酶） 核糖核酸酶T1（RNaseT1），作用位点是3’ -鸟苷酸与其它核苷酸的5’-OH间的键。（内切核酸酶） 5′ p p p p OH Py Pu Py Pu 1′ p p p G A C U p p p G A 3′ RNAase I RNAase I RNAase T1 RNAase T1 第三页，共三十七页，2022年，8月28日 只能水解DNA磷酸二酯键的酶。 牛胰脱氧核糖核酸酶（DNaseⅠ），可切割双链和单链DNA，降解产物为3’-磷酸为末端的寡核苷酸。 限制性核酸内切酶：细菌体内能识别并水解外源双源DNA的核酸内切酶，可特异切割外源DNA特定序列中的磷酸二脂键(对碱基序列专一），切断双键，常作为工具酶。? 二、 脱氧核糖核酸酶 第四页，共三十七页，2022年，8月28日 限制性内切酶类型 I型：识别位点与切割位点相差甚远 Ⅱ型：切割位点位于识别位点上，产物为专一性片段。分子生物学研究所用的限制性内切酶均为此类。 Ⅲ型：识别位点为5-7bp的非对称序列 ，切割位点在顺序之外离识别序列5-10bp 第五页，共三十七页，2022年，8月28日 产生3ˊ-OH和5ˊ-P的末端 限制性内切酶Ⅱ 第六页，共三十七页，2022年，8月28日 限制性内切酶的命名和意义 Eco R I 序号 属名 种名 株名 例：Eco R I，这是从大肠杆菌（E. coli）R菌珠中分离出的一种限制性内切酶 限制性内切酶是分析染色体结构、制作DNA限制图谱、进行DNA序列测定和基因分离、基因体外重组等研究中不可缺少的工具，是一把天赐的神刀，用来解剖纤细的DNA分子。 第七页，共三十七页，2022年，8月28日 第八页，共三十七页，2022年，8月28日 既可水解RNA，又可水解DNA磷酸二酯键的核酸酶。 小球菌核酸酶（内切酶），可作用于RNA或变性的DNA，产生3’-核苷酸或寡核苷酸。 蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶（外切酶）。 三、 非特异性核酸酶 第九页，共三十七页，2022年，8月28日 蛇毒磷酸二酯酶能从RNA或DNA链的游离的3’-OH逐个水解，生成5’-核苷酸。 牛脾磷酸二酯酶从游离的5’-OH开始逐个水解，生成3’核苷酸。 第十页，共三十七页，2022年，8月28日 第二节 核苷酸的生物降解 核酸酶（磷酸二酯酶） 核苷酸酶（磷酸单酯酶） 核苷磷酸化酶 核酸 核苷酸 核苷 磷酸 嘌呤或嘧啶 戊糖-1-磷酸 第十一页，共三十七页，2022年，8月28日 第二节 核苷酸的生物降解 核酸酶（磷酸二酯酶） 核苷酸酶（磷酸单酯酶） 核苷磷酸化酶 核酸 核苷酸 核苷 磷酸 嘌呤或嘧啶 戊糖-1-磷酸 一、核苷酸的降解 第十二页，共三十七页，2022年，8月28日 一、核苷酸的降解 1、 核苷酸酶 （磷酸单脂酶） 水解核苷酸，产生核苷和磷酸。 第十三页，共三十七页，2022年，8月28日 2、核苷磷酸化酶 广泛存在，反应可逆 核苷 + 磷酸 核苷磷酸化酶 碱基 + 戊糖-1-磷酸 第十四页，共三十七页，2022年，8月28日 不同生物降解的产物不同 二、嘌呤的降解 第十五页，共三十七页，2022年，8月28日 （人类和灵长类动物） （灵长类以外的哺乳动物） 第十六页，共三十七页，2022年，8月28日 尿囊酸酶 H2O 脲酶 2H2O 4NH3 + 2CO2 乙醛酸 尿素 OH NH2 尿囊酸 （植物） （鱼类、两栖类） （海洋无脊椎动物） 脱氨 氧化 水解 第十七页，共三十七页，2022年，8月28日 三、嘧啶的降解 脱氨 还原 水解 第十八页，共三十七页，2022年，8月28日 一、嘌呤核苷酸的生物合成 从头合成途径 补救途径 二、嘧啶核苷酸的生物合成 从头合成途径 补救合成途径 第三节 核苷酸的生物合成 三、脱氧核苷酸的合成 第十九页，共三十七页，2022年，8月28日 （1）嘌呤环上各原子的来源 N3 N9 N7 N1 C2