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- 2022-12-11 发布于广东
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细胞悬浮培养起始培养物的建立 选择适宜的外植体:幼胚、胚轴、子叶是最常使用的外植体。 选择适宜的培养基:较高浓度激素;必要的附加物质。 愈伤组织的要求:松散性好、增殖快、再生能力强。 第三十一页,共六十三页,2022年,8月28日 建立细胞悬浮系 第三十二页,共六十三页,2022年,8月28日 悬浮细胞的生长与增殖 悬浮培养与固体培养比较有三个优点: 一是增加培养细胞与培养液的接触面,改善营养供应; 二是在振荡条件下可避免细胞代谢产生的有害物质在局部积累而对细胞自身产生毒害; 三是振荡培养可以适当改善气体的交换。 第三十三页,共六十三页,2022年,8月28日 悬浮培养细胞数目的增殖变化 第三十四页,共六十三页,2022年,8月28日 细胞生长各个时期的特点:滞后期(延迟期): 细胞很少分裂,其长短与接种量、大小和继代时原种细胞所处的生长期有关; 对数生长期:细胞分裂活跃,细胞数目增加,增长速率保持不变直线生长期:细胞生长和发育最明显的时期缓慢期:生长逐渐缓慢,培养液消耗将尽,有毒代谢物质增多,氧气减少; 静止/平台期:生长几乎处于停止状态,细胞数目增加极少,甚至开始死亡。衰亡期:细胞死亡速度加快,细胞开始快速自溶,死亡。 第三十五页,共六十三页,2022年,8月28日 成功的悬浮细胞培养体系必须满足三个条件: 悬浮培养物分散性良好,细胞团较
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