植物细胞培养的技术.pptVIP

第一页，共二十三页，2022年，8月28日 植物细胞培养的技术 一、植物材料的准备 二、培养基制备 三、培养方法选择 第二页，共二十三页，2022年，8月28日 一、植物材料的准备 用于植物组织培养的外植物必须是无菌材料，因此培养前必须对外植物进行严格的灭菌处理。如果含有其他微生物，在培养基中，其他微生物会大量迅速繁殖从而影响植物组织的培养。 灭菌剂选择的原则：尽可能的选择那些灭菌后易于除去的试剂。灭菌剂的原则和处理时间的长短取决与所选材料对试剂的敏感性，敏感的外植物体的灭菌时间不宜过长。 第三页，共二十三页，2022年，8月28日 常用灭菌剂有次氯酸钙、次氯酸钠和氯化汞。 次氯酸钙为工业漂白粉过滤后的饱和溶液，适用于草本植物和柔软组织的灭菌处理，时间为5-30min。 氯化汞灭菌效果好，但不易除去，时间不易过长，以免杀死植物细胞，当其用于休眠种子的灭菌剂最为理想，适用浓度为0.1%，2-10min，种子皮较厚时可延长至20min以上。 第四页，共二十三页，2022年，8月28日 二、培养基及其组成 培养基实际上是植物离体器官、组织或细胞的“无菌土壤”，其特点是营养成分的可调控性。 植物细胞或组织培养基常含有无机盐、碳源、有机氮源、植物生长激素、维生素等成分。必需营养物是否加入、浓度的高低、各族非得相对浓度等