自身抗体的实验室检测及临床意义.pptxVIP

会计学主要内容第1页/共51页自身抗体的概念自身抗体的分类自身抗体的命名自身抗体的检测方法常见的自身抗体自身抗体的概念第2页/共51页各种原因造成的机体B细胞产生的针对自身组织成分的抗体，称为自身抗体（autoantibodies）。自身抗体可以是生理性的，如针对衰老或死亡的自体细胞，机体产生少量的自身抗体，以便被脾、肝及单核吞噬细胞系统的巨噬细胞吞噬，维持机体内环境的生理稳定；自身抗体也可以是病理性的，引起自身免疫病。自身抗体的分类第3页/共51页按照自身抗原在体内分布的不同可分为：器官/组织特异性自身抗体非器官/组织特异性自身抗体按照检测自身抗体所用的基质不同可分为：细胞抗体（以游离的细胞为实验基质）细胞非特异性自身抗体，如抗核抗体细胞特异性自身抗体，如ANCA、抗血小板抗体、抗红细胞抗体组织抗体（以动物组织切片为实验基质）自身抗体的命名第4页/共51页以首先被检测到该抗体的患者名字的缩写命名：如抗Sm、抗Ro、抗La抗体以相关疾病的名字的缩写命名：如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗体以抗原的化学性质进行分类命名：如抗DNA、抗RNP抗体以抗原的部位进行命名：如抗板层素抗体、抗核膜抗体。自身抗体的检测方法第5页/共51页对流免疫电泳、免疫双扩散免疫荧光检测法免疫印记法酶联免疫吸附检测法（ELISA）放射性核素法酶免疫斑点技术免疫沉淀法第6页/共51页ANA (anti-nuclear antibodies)间接免疫荧光方法抗核抗体(ANA) 抗dsDNA抗体金标法抗dsDNA抗体抗Sm抗体抗RNP抗体抗SSA抗体抗SSB抗体免疫双扩散法第7页/共51页 ENA (extractable nuclear antigen)抗Sm抗体抗RNP抗体抗SSA抗体抗SS B抗体抗Scl-70抗体抗Jo-1 抗体抗核糖体抗体免疫印记法第8页/共51页 自身抗体抗核抗体(ANA)抗平滑肌抗体(SMA)抗线粒体抗体(AMA)间接免疫荧光法第9页/共51页间接免疫荧光法病人血清(一抗)荧光抗体二抗玻片底物ANA－－Hep-2细胞dsDAN抗体－－短膜虫SMA－－大鼠胃组织AMA－－大鼠肾组织荧光显微镜下阅片第10页/共51页　金标法病人血清金标记的抗体阴性阳性dsDNA抗原第11页/共51页免疫双扩散标准抗体病人血清琼脂板1:4抗原1:641:161:32第12页/共51页免疫印记法病人血清酶标抗体显色剂不同分子量的抗原判断结果第13页/共51页抗Sm抗体13.5, 28, 29KD抗RNP抗体22, 32,70KD抗SSA抗体52KD抗SS B抗体45, 47KD抗Scl-70抗体68-70KD抗Jo-1 抗体55KD抗核糖体抗体15, 16.5, 38KD间接免疫荧光法第14页/共51页细胞核阳性核仁阳性细胞浆阳性分裂期细胞阳性细胞核阳性第15页/共51页细胞核均质型（Homogeneous）：抗dsDNA、组蛋白抗体、核小体抗体细胞核周边型（Membranous）：板层素抗体细胞核颗粒型（Speckled）：粗颗粒：抗Sm、RNP抗体细颗粒：抗SSA、SSB抗体抗dsDNA抗体第16页/共51页荧光模式：绿蝇短膜虫：动基体均质的或边缘亮度增强的荧光。Hep-2细胞：细胞核的均质型荧光。抗dsDNA抗体第17页/共51页自身抗原：位于DNA脱氧核糖磷酸框架上。临床意义：对系统性红斑狼疮（SLE）特异性高。抗体滴度与疾病活动性存在相关性，因此抗体滴度的检测可为监控治疗提供有用的依据。抗RNP/Sm抗体第18页/共51页荧光模式：Hep-2片：细胞核粗颗粒，核仁阴性。肝组织切片：同上。荧光法不能区分抗RNP和抗体Sm。抗RNP/Sm抗体第19页/共51页自身抗原：抗原RNP和Sm属于一组小核糖核蛋白（snRNP），由低分子量的RNA和多种蛋白质组成，RNA中尿苷（U-RNA）含量较高。临床意义：高滴度的抗RNP抗体为 混合结缔组织病（MCTD）的特征，发生率为95~100%。也可出现于SLE，但总是与抗Sm抗体同时出现。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性，发生率为20~40%。抗SSA／SSB抗体第20页/共51页荧光模式Hep-2片：细胞核呈细颗粒荧光，核仁不发光。肝组织片：细颗粒荧光。抗SSA／SSB抗体第21页/共51页自身抗原：SSA抗原是一个小核糖核蛋白，由一个RNA分子和两种不同的蛋白质组成。蛋白质的分子量为52KD和60KD。抗体直接针对蛋白质的抗原决定簇。SSB抗原是分子量为48kD的磷酸化蛋白。临床意义；最常见于干燥综合征（SS）,也见于SLE、原发性胆汁性肝硬化（PBC），偶见于慢活肝。抗SSA抗体在新生儿红斑狼疮的发生率几乎为100%。核仁阳性(Nucleolar)第22页/共51页核仁荧光增强，核浆均质型---S