酶切若干问题.pdfVIP

酶切现象及影响因素详解 1 先说一下酶切对象 (1) 质粒 要是对质粒进行酶切，那么质粒的纯度挺重要，污染有 DNase 和残留质粒提取中的 酚以及高盐对 DNA 酶切都不利，还有 RNA 要去除干净。以上所提的这些这都会影响酶切效果。 解决方法 DNase 污染 ：质粒提取的试剂都要进行灭菌，提取时不要拖拉，电泳缓冲液要长换， 以免电泳液造成DNA 降解，电泳液的pH 不要偏酸，容易降解 DNA.在最后溶解 DNA 时，可以采用 TE 和水，建议用 TE，TE 可以鳌合金属离子，使 DNase 失活。酶切时，TE 也