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- 2023-01-03 发布于山东
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寄生虫卵粪便检查法
许多寄生虫的虫卵、卵囊或幼虫可随宿主的粪便排出体外.通过检查粪便,可以确定是否
感染寄生虫及其种类和感染强度。粪便检查在寄生虫病诊断、流行病学调查和驱虫效果评定
上均具有重要意义。
一、目的及要求
1、掌握直接涂片法、漂浮法、沉淀法检查寄生虫卵。
2、在光学显微镜下区分虫卵、幼虫或虫体和异物。
3、观察常见吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等寄生虫虫卵,掌握其一般特征。
二、实验内容
(一)粪样采集及保存方法
1.被检粪样应该是新鲜且未被污染,最好从直肠采取。
2。大动物按直肠检查的方法采集;小动物可将食指套上塑料指套,伸入直肠直接钩取粪
便.自然排出的粪便,要采取粪堆上部未被污染的部分。
3.采取的粪便应装入清洁的容器内.采集用品最好一次性使用,如多次使用则每次都要
清洗,相互不能污染。
4。采取的粪便应尽快检查,否则,应放在冷暗处或冰箱冷藏箱中保存.当地不能检查需
送出或保存时间较长时,可将粪样浸入加温至 50~60℃、5%~10%福尔马林中,使其中的虫
卵失去活力,但仍保持固有形态,还可以防止微生物的繁殖.
(二)直接涂片法(Examination of Direct Smears)
在清洁的载玻片上滴 1—2滴水或 1滴甘油与水的等量混合液(加甘油的好处是能使标本
清晰,并防止过快蒸发变干),其上加少量粪便,用火柴棍儿仔细混匀。再用镊子去掉大的草
棍儿和渣子等,之后加盖玻片,置光学显微镜下观察虫卵或幼虫.
注意涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时,纸上的字迹隐约可见为宜。直接涂
片法的优点是简便易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查;缺点是对虫卵含量低的粪便检
出率低.因此在实际工作中,需多检几片,以提高检出率.检查虫卵时,先用低倍镜顺序查盖
玻片下所有部分,发现疑似虫卵物时,再用高倍镜仔细观察。因一般虫卵(特别是线虫卵)
色彩较淡,镜检时视野宜稍暗一些(聚光器下移)。
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图 1—1—1 直接涂片法示意
另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法.取 2~3g 粪样加清水 2~3 倍,充分混匀成悬
液。后用玻璃棒搅拌 0.5-1min,使之成回旋运动,在搅拌过程中迅速提起玻璃棒,将棒端附着
的液体放于载片上涂开,加上盖片在镜下检查。检查时多取几滴悬液.该方法的原理是由于回
旋搅动的结果,可使玻璃棒端悬液小滴中附有较多量的寄生虫卵或幼虫。
(三)漂浮法(Method Involving Flotation )
其原理是采用比重高于虫卵的漂浮液,使粪便中的虫卵和粪便渣子分开而浮于液体表
面,然后进行检查。本法对大多数线虫卵、绦虫卵及球虫卵囊均有效;但对吸虫卵、后圆线
虫卵和棘头虫卵效果较差。漂浮液通常多采用饱和盐水,方法简便易行.
饱和盐水的制备 把食盐加入沸水锅内,直到食盐不再溶解而出现沉淀为止 (1000ml沸
水中加入约 400g 食盐)。精制盐配制的饱和盐水一般不必过滤,待冷却后即可使用(冷却后
的溶液有食盐结晶析出,即为饱和);粗制盐配制的饱和液可用滤纸、纱布或棉花过滤后备
用。
漂浮方法 取新鲜粪便 2g 放在平皿中,用镊子或玻璃棒压碎,加入 10倍量的饱和盐水,
搅拌混合,用粪筛或纱布过滤到平底管中,使管内粪汁平于管口并稍隆起为好,但不要溢出。
静置 30 分钟左右,用盖片蘸取后,放于载片上,镜下观察;或用载片蘸取液面后翻转,加盖
片后镜检;也可用特制的铁丝圈进行蘸取检查.
铁丝圈
图 1—1—2 漂浮法示意
注意事项 漂浮时间约为 30 分钟左右,时间过短(少于 10分钟)漂浮不完全;时间过
长 (大于 1小时)易造成虫卵变形、破裂,难以识别;检查多例粪便时,用铁丝圈蘸取一例后,
再蘸取另一例时,需先在酒精灯上烧过后再用之,以免相互污染,影响结果的准确性。漂浮液
必须饱和,且保存在不低于 13℃的情况下,才能保持较高的比重。否则效果难以保证。
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在使用饱和食盐液漂浮虫卵时,只能把线虫卵
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