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会计学13-1菊花的组织培养 2023/1/5一、实验目的 二、相关知识三、实验原理四、试剂和器材五、操作步骤六、思考题目 录生物基础实验教学中心吉林大学第1页/共50页 2023/1/53一、实验目的掌握植物组织培养相关理论知识掌握植物组织培养的操作方法了解不同激素及其比例对愈伤组织再分化的作用第2页/共50页 2023/1/54二、相关知识 离体（in vitro)条件下利用人工培养条件在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整植株的过程。 1958年，英国科学家Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。 第3页/共50页 2023/1/55应用领域 1、快速繁殖 运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株。例如一株兰花一年繁殖到400万株。　　2、种苗脱毒 针对病毒对农作物造成的严重危害，通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗。　　3、远缘杂交 利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种。二、相关知识第4页/共50页 2023/1/56应用领域 4、突变育种 采用组织培养可以直接诱变和筛选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状的品种。　　5、基因工程 基因工程主要研究DNA的转导，而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生。　　6、生物制品 有些极其昂贵的生物制品，如抗癌首选药物--紫杉醇等，可通过组织培养方式生产。二、相关知识第5页/共50页 2023/1/57植物组织培养的分类 广义的组织培养依外植体不同，可分为： 1) 器官培养（organ culture） 2)茎尖分生组织培养(shoot tip culture, apical meristem culture) 3)愈伤组织培养(calluse cultrue) 4)细胞培养(cell culture) 5)原生质体培养(protoplast culture)二、相关知识第6页/共50页 2023/1/58 外植体(explant)：由活体（in vivo)植物体上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。 愈伤组织(callus)：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。二、相关知识第7页/共50页 2023/1/59二、相关知识第8页/共50页 2023/1/510二、相关知识第9页/共50页 2023/1/511二、相关知识第10页/共50页 2023/1/512二、相关知识第11页/共50页 2023/1/513二、相关知识第12页/共50页 2023/1/5二、相关知识第13页/共50页 2023/1/515植物组织培养特点 ①培养条件可以人为控制 ②生长周期短，繁殖率高 ③管理方便，利于工厂化生产和自动化控制二、相关知识第14页/共50页 2023/1/516植物组织培养营养条件-培养基(Culture Medium) 培养基是植物组织培养的重要基质。 培养基的成分主要可以分水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。二、相关知识第15页/共50页 2023/1/517 国际上流行的培养基有几十种，常用的培养基有： MS培养基、B5培养基、White培养基、N6培养基、KM-8P培养基二、相关知识第16页/共50页 2023/1/518常用培养基简介--MS培养基 1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。二、相关知识第17页/共50页 2023/1/519常用培养基简介--B5培养基 是1968年由Galmborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。二、相关知识第18页/共50页 2023/1/520常用培养基简介--White培养基 是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机机盐数量较低，适于生根培养。二、相关知识第19页/共5