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RNA的生物合成转录药学会计学第1页/共28页RNA的生物合成包括RNA转录 —生物体以DNA为模板合成RNA的过程 称为转录或基因转录。RNA复制 —某些RNA病毒传递遗传信息的方式第2页/共28页第一节 RNA转录体系 DNA模板 四种NTP RNA聚合酶 某些蛋白因子 必要的无机离子第3页/共28页一、DNA是RNA转录的模板（一）转录是不对称的 * 不是细胞内DNA全长都转录* 转录时一条DNA链起转录生成 ，称模板链(template strand)，或称有意义链与其互补的DNA链无转录活性称编码链(coding strand)，或称反意义链。第4页/共28页编码链与RNA的序列完全相同，只是T换成U 5’3’3’5’第5页/共28页 DNA双链中包含许多基因，而各基因的模板链不全在同一条链上，这种现象称为不对称转录。即： （1）DNA双链中一条转录时，另一条链不 被转录； （2）模板链并非永远在同一条链上。第6页/共28页（二）可转录的DNA一个区段为一个转录单位转录单位3’5’调节组件结构基因启动子调节基因操纵基因可转录出RNA的区段启动子(promotor)： 是转录起始点之前的一段核苷酸序列，是RNA聚合酶识别和结合的部位，又称启动基因。第7页/共28页* 原核生物启动子：终止位点+1-35区-10区转录方向3’5’RNA* 真核生物启动子：核心启动子：TATA盒、起始子(initiator)近侧序列元件：GC盒、CAAT盒、OCT盒等第8页/共28页二、RNA聚合酶是转录的主要酶 RNA聚合酶即DNA指导的RNA聚合酶 ( DNA directed RNA polymerase, DDRP)（一）RNA转录的化学反应模板：单链DNA原料：4种NTP产物：RNARNA聚合酶(NMP)nppiNTP+第9页/共28页（二）RNA聚合酶具有多种功能* 5’→3’聚合活性使核苷酸通过磷酸二酯键依次聚合* 解旋解链酶的活性将模板DNA链解开一小段（≤20个碱基对）--缺乏3’?5’外切酶活性，无校读功能第10页/共28页（三）原核生物的RNA聚合酶全酶：五个亚基（?2??’?）组成 ?2??’ 称为核心酶 参与RNA链的延长 ?亚基称为起始因子 辨认启动子，协助转录起始 第11页/共28页参与核心酶的组装结合底物并催化形成磷酸二酯键催化活性中心抗结核菌药利福霉素可抑制原核生物转录： 与?亚基非共价结合，阻止第一个NTP的进入第12页/共28页（四）真核生物的RNA聚合酶 RNA聚合酶I、II、III（hnRNA)、snRNA第13页/共28页第二节 RNA转录的基本过程三个阶段： 起始 延长 终止以原核生物为例：第14页/共28页一、链的起始? 因子辨认启动子并与核心酶结合为全酶识别转录起始点RNA聚合酶将DNA局部解链17bp，第15页/共28页* 起始点，RNA聚合酶催化2个NTP按碱基 配对原则以氢键结合于DNA模板，生成 第1个磷酸二酯键 * 通常转录开始即5’端是pppA或pppG * RNA聚合酶全酶-DNA-pppGpN-OH-3’ 称为转录起始复合物* 转录起始不需要引物* 转录开始后，? 因子脱落并可反复利用第16页/共28页二、链的延长 由核心酶催化 RNA链延长方向5′? 3′核心酶第17页/共28页三、链的终止原核生物转录终止方式：1、不依赖?因子的终止(terminaor)终点的寡聚U富含CG的发夹结构第18页/共28页2、依赖?因子的终止?因子（终止因子，termination factor） * 六聚体，50kD，有依赖RNA的ATP酶活性， 是一种RNA-DNA解旋酶。 * 识别新生RNA链上的终止信号，使RNA-DNA 双螺旋解开，释放RNA，并和RNA聚合酶一 起脱落。第19页/共28页第20页/共28页第三节 RNA转录后的加工过程转录产物在原核和真核生物的去路：原核：无核，连续基因，很少加工真核：有核，断裂基因，需加工， 才成为有生物功能的RNA， 即RNA的成熟过程。第21页/共28页一、信使RNA(mRNA)的加工真核细胞的 mRNA是由其前体hnRNA加工而成1、剪接(splicing) *剪内含子，接外显子 *选择性剪接产物不同2、5’端加m7GTP“帽” 3、3’端加polyA“尾”4、碱基的修饰5、RNA的编辑与RNA沉默第22页/共28页二、转运RNA(tRNA)的加工1、切去5’端部分核苷酸2、切去3’端几个核苷酸，加入CCA末端3、含多个tRNA 前体的剪切4、碱基的修饰第23页/共28页三、核蛋白体RNA(rRNA)的加工1、rRNA的剪切2、碱基的修饰第24页/共28页第四节 核酶——具有催化功能的RNA1982年，美，Thom