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microbialgenetics遗传物质基础会计学微生物遗传的物质基础是DNA或RNA第1页/共44页三个经典实验可以证明：肺炎双球菌转化实验噬菌体感染实验植物病毒重建实验第2页/共44页—证明了DNA为遗传物质1952年和通过 T2噬菌体感染 E.coli实验证明DNA为遗传物质第3页/共44页第4页/共44页3.植物病毒重建实验第5页/共44页证明了RNA为遗传物质1956，Fraenkel-conrat用含有RNA的TMV和HRV进行了植物病毒重建实验。第6页/共44页生化提取分别获得含RNA的烟草花叶病毒蛋白质外壳（病毒1）和核酸（病毒2(霍氏车前花叶病毒)证明杂种病毒的蛋白质外壳来自病毒1，而非病毒2杂种病毒的后代的蛋白质外壳表现为病毒2，而非病毒1遗传物质是核酸（RNA）而非蛋白质第7页/共44页亚病毒的一种：具有传染性的蛋白质致病因子，迄今为止尚未发现该蛋白内含有核酸。其致病作用是由于动物体内正常的蛋白质改变折叠状态所致，而蛋白质的一级结构并没有改变。朊病毒第8页/共44页第9页/共44页不致病致病第10页/共44页引起人与动物的致死性中枢神经系统疾病第11页/共44页羊搔痒症(scrapie)牛海绵状脑病(spongiform encephalopathy)人的库鲁病(kuru)、克雅氏病(Creutzfeldt Jakob disease, CJD)等朊病毒的复制不符合遗传信息的中心法则朊病毒的复制可能的方法:第12页/共44页可能先由PrP转译成RNA或DNA，然后再合成子代PrP。这一过程需要逆转译酶和逆转录酶; 蛋白质指导下的蛋白质合成，朊病毒的氨基酸序列可直接作为模板合成新的蛋白质分子. 具有侵染性且不含核酸的蛋白质 第13页/共44页Prusiner (1982)提出羊搔痒病因子是一种蛋白质侵染颗粒（proteinaceous infectious particle），并将之称做Prion或Virino。 -------朊病毒1997年，Stanley B. Prusiner荣获诺贝尔奖第一节 病毒和噬菌体的遗传物质第14页/共44页一、大肠杆菌MS2噬菌体RNAssRNA, 极性+；+RNA：可作为复制的模板，又可作为mRNA直接翻译产生蛋白质-RNA：必须通过RNA复制产生的互补链作为mRNA进行翻译．第15页/共44页MS2的RNA含有三个基因，分别编码外壳蛋白、A蛋白和复制酶；１翻译从外壳蛋白基因开始，首先合成 大量外壳蛋白；２复制酶基因打开，合成RNA复制必须的复制酶；　外壳蛋白抑制复制酶合成 ；第16页/共44页３以+RNA为模板，复制 RNA。外壳蛋白合成受到抑制；４A蛋白仅在复制时打开的+RNA链上合成（以+RNA为mRNA ）；结果是复制一分子RNA ，合成一分子A蛋白。A蛋白:使噬菌体能识别宿主，并使其RNA基因组能进入宿主菌 .第17页/共44页二、大肠杆菌 φ×174噬菌体DNA第18页/共44页φ×174为SSDNA，1977年由英国Frederick sanger分析确定；含11个基因（96%编码蛋白质 ），只转录3个mRNA（分别从A,B,D开始），编码11种蛋白质；基因排列体现经济原则，有重叠基因（首次发现）和基因内基因。第19页/共44页三、大肠杆菌λ噬菌体DNAE.coli λ噬菌体为 dsDNA，两端各有一个12kb的粘性末端GGGCGGCGAC CT, CCCGCCGCTGGA，称为cos区，全长 .第20页/共44页已鉴定出35个基因λattP位点有15bp，可以识别寄主染色体DNAattB 位点，在λint基因编码整合酶作用下，使λ插入到寄主染色体中；在λxis基因编码的切除酶作用下从染色体上脱落，进行复制、转录和翻译装配；第21页/共44页整合的λcⅠ基因可产生阻遏蛋白，与左右两个操作子结合，阻碍两个早期基因转录。因此不能合成λ复制所需要的蛋白质。阻遏蛋白可以被紫外线、丝裂霉素作用失活从而诱导原噬菌体状态变为λ噬菌体，使细胞裂解。λ噬菌体的溶源 和裂解 第22页/共44页第二节 原核微生物的遗传物质一、大肠杆菌染色体DNAE. coli DNA在细胞中构成类核；DNA双螺旋上有许多蛋白结合位点, 染色体DNA上有几种结合蛋白 ；DNA结合蛋白使染色体DNA压缩成手脚架形；DNAase 作用使其松散。第23页/共44页第24页/共44页第25页/共44页E.coli染色体DNA含有4.2×106bp，约3000-4000个基因，已经定位1500个，主要规律为：1基因表达和调控是通过操纵元完成的。第26页/共44页操纵元：功能上相关的几个基因，再加上一个共同的调节基因、一组共同的调节位点 promoter 和operator在基因转录时协同作用，这样的