实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病miR125b的表达及临床应用.pdfVIP

实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病miR-125b的表达及 临床应 王语欣;杨冬琴;周静东;林江;姚东明;杨静;钱震;杨磊;钱军 【摘要】目的 采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中微小 RNA-125b(microRNA-125b,miR-125b)转录本含量,初步 评价其在 AML 临床诊断中的意义. 方法 建立扩增 miR-125b 转录本的 SYBR Green I 染料法 qPCR,对 miR-125b 转录本克隆质粒进行扩增,评价其在 AML 诊断 中的特异性、重复性和灵敏性.并对 69 例 AML 患者的骨髓单个核细胞标本进行初 步检测并评价其临床相关性. 结果 该方法能定量检测骨髓标本中 miR-125b 的表 达水平,熔解曲线呈单峰,在 108 ～ 103 copies/μL 范围内有良好的线性关系 (R2=0.999)并且检测重复性良好.结果显示 69 例 AML 患者中 miR-125b 表达水 平明显高于 25 例对照组,差异有显著统计学意义(P=0.001).在初发 AML 的不同亚