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会计学1霍乱弧菌实验室检验技术 2023/1/11内容一、霍乱概述二、霍乱病原学三、霍乱弧菌常规检验四、霍乱弧菌的快速诊断五、霍乱弧菌的噬菌体-生物分型六、霍乱菌株的管理、保存与上送第1页/共43页 2023/1/11一、霍乱概述霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）引起的急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波及范围广、危害严重的甲类传染病。是国内交通检疫传染病之一。也是当今三种国际检疫传染病中最严重的一种。第2页/共43页 2023/1/11霍乱病原菌发现1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌1905年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌，与霍乱弧菌甚为相似，但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度腹泻，直到1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到ElTor弧菌致病性1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌第3页/共43页 2023/1/11二、霍乱病原学霍乱的病原学分类霍乱的病原学特征第4页/共43页 2023/1/11霍乱弧菌抗原结构及分类抗原结构 霍乱弧菌有耐热的菌体（O）抗原和不耐热的鞭毛（H）抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有；O抗原有群特异性和型特异性两种抗原，是霍乱弧菌分群和分型的基础。WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。01群霍乱弧菌：包括古典生物型霍乱弧菌（vibrio cholerde）和埃尔托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群的特异抗原有A、B、C三种，其中A抗原为01群所共有，A抗原与其他B与C抗原结合则可分为三型，即：原型——AC（稻叶，Inaba）、异型——AB（小川，Ogawa）和中间型——ABC（彦岛，Hikojima）。第5页/共43页 2023/1/11非01群霍乱弧菌：本群弧菌鞭毛抗原与01群相同，而菌体（0）抗原则不同，不被01群霍乱弧菌多价血清所凝集，依O抗原之异，本群可分为137个血清型。以往认为本群仅引起散发的胃肠炎性腹泻，一般此类弧菌感染不作霍乱处理，但1992年在印度及孟加拉等地发生霍乱暴发流行，后证实流行菌不被01群和137个非01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。乃定为0139霍乱弧菌，并认定为真正的霍乱弧菌。不典型01群霍乱弧菌：可被多价01群血清所凝集，但该群菌不产生肠毒素，因此无此病性第6页/共43页 2023/1/11霍乱病原体分类 古典生物型 小川型 O1群 稻叶型 埃尔托生物型 颜岛型霍乱弧菌 霍乱病原菌 O139群（Bengal） 非O1群 O2-O200群 腹泻病原菌第7页/共43页 2023/1/11O1群和O139群抗原构造与血清分型群特异性抗原型特异性抗原AO139BC小川+++少量稻叶+—+彦岛+++O139— +——第8页/共43页 2023/1/11霍乱病原学特点形态与染色弧状或逗点状革兰染色阴性有一根单鞭毛，细菌运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状第9页/共43页 2023/1/11革兰染色第10页/共43页 2023/1/11电镜负染色—鞭毛第11页/共43页 2023/1/11O139群和O1群霍乱弧菌特性对比 近年来，O139群霍乱弧菌已成为霍乱流行的主要病原。通过研究证明，O139群霍乱弧菌可能是O1群EItor 生物型的变异株。 (1)抗原构造 (2)分泌肠毒素 (3)耐药性 (4)临床特点第12页/共43页 2023/1/11 抗原构造O139群霍乱弧菌不被已知的O1-O138群霍乱弧菌诊断血清所汇集。表明本菌的抗原性与O1群和其它非O1群霍乱弧菌有明显区别。 革兰氏阴性菌的抗原性都是由细胞壁的脂多糖（LPS）所决定。通过对O139群霍乱弧菌的LPS进行化学分析和血清学分析后发现O139群霍乱弧菌缺少O1群霍乱弧菌LPS中的特异性成分。 通过两者进行提取其LPS然后进行被动溶血试验与被动