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- 2023-01-31 发布于上海
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动物遗传学实验教学会计学第1页/共10页一、实验原理琼脂糖是一种天然聚合长链状分子,可以形成具有刚性的滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带第2页/共10页二、实验目的 掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法第3页/共10页三、实验材料、器具及药品 猪基因组DNA及PCR产物 电泳仪,电泳槽,电子天平,移液器,枪头, 微波炉,紫外透射检测仪等。 琼脂糖,1XTAE电泳缓冲液,溴化乙锭(EB),6X载样缓冲液 :Ⅰ 0.25%溴酚蓝 ,0.25%二甲苯青 ,40%蔗糖水溶液;Ⅱ 0.25%溴酚蓝 ,0.25%二甲苯青 ,30%甘油水溶液第4页/共10页四、实验步骤(1)⑴ 1g 琼脂糖加入100ml 1×TAE电泳缓冲液中,摇匀。在微波炉中加热至琼脂糖完全溶解。(冷却到60℃,加入100μl的,并摇匀。)⑵ 用胶带将制胶板两端封好,插入适当梳子,将溶解的琼脂糖(约50℃)倒入,室温冷却凝固⑶ 充分凝固后撕掉两端的胶布,将凝胶置入电泳槽中,加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶1-2mm,小心垂直向上拔出梳子。第5页/共10页四、实验步骤(2)(4) 用移液器吸取总DNA或质粒样品4μl于封口
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