胚胎冷冻保存技术.pptxVIP

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  • 2023-02-01 发布于上海
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会计学;; 胚胎冷冻保存是采取特殊的保护措施和降温程序,使胚胎或卵母细胞在-196℃的条件下停止代谢,而升温后又不失去代谢恢复能力的一种长期保存胚胎和卵母细胞的技术。;第3页/共27页;图为世界首例冷冻胚胎克隆水牛“盼盼”(左)与“代孕妈妈”在一起; 原 理;意 义;冷冻损伤原因;诱发结晶 使用冷冻保护剂 玻璃化;诱发结晶 在-7℃左右时通过人工强制诱发结晶,以避免较大冰晶的形成和剧烈的温度变化。诱发结晶主要在降温速率较慢的冷冻方法中使用。诱发方法有两种:①用液氮预冷过的镊子夹麦管中部含卵母细胞的冷冻液上部;②在冷冻液中加入制冷剂晶母等。 使用冷冻保护剂 玻璃化;诱发结晶 使用冷冻保护剂 冷冻保护剂渗入到细胞内后,能增加整个细胞的粘度和细胞内的溶质浓度,使冰晶生长的驱动力减弱,减少冰晶的形成。 玻璃化; ⑴ 渗 透 性:甘油、乙二醇(EG)、丙二醇(PG)和DMSO等,防止溶质效应。 ⑵ 非渗透性:蔗糖、海藻糖、聚乙二醇、PVP和聚蔗糖等,降低胚胎外液的冰点,减少胚胎外冰晶形成,并能促使胚胎内部的水分外流,从而最终减少胚胎内部冰晶的形成。 ;诱发结晶 使用冷冻保护剂 玻璃化 玻璃化是高浓度的冷冻保护液在低温或超低温下溶液由液相变为固相时,其内部的分子、离子分布不改变其原有的分布,不形成有规则外表的物质形态,可有效避免冰晶形成时对卵母细胞内部骨架结构和亚

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