(三)薯块淀粉含量测定:高氯酸水解-蒽铜比色法 :
实验原理:用乙醇溶液去除饲料样品中的可溶性糖,再用高氯酸溶液溶解残留物 中的淀粉,使淀粉与其他成分分离,在浓硫酸的作用下,蒽酮与淀粉反应生成蓝绿色的化合 物,用分光光度计测定在640 nm 下的吸光度.试剂配制:80%乙醇溶液;52%高氯酸溶液; 蒽酮试剂(将0.4 g 蒽酮溶于100 mL88%硫酸溶液中,现用现配);淀粉标准液(将200 mg 淀粉倒入100mL 烧杯中,加入5 mL 蒸馏水,加入65 mL52%高氯酸溶液,搅拌全部溶解,转入100 mL 溶量瓶中,加水定容,浓度2 mg/mL;取上述标准淀粉溶液10.00 mL 于250 mL 溶量瓶中,加水定容,此淀粉溶液的浓度为80 ug/mL. )
标准曲线:在洁净的试管,分别加入0μL、250μL、500μL、1000μL、1500μL、2000μL淀粉标准液,每一个浓度3个重复,加水调整各试管溶液均为2.00 mL,在冰水中冷却2 min加入6.00 mL蒽酮-硫酸溶液,摇匀,在冰水中冷却2 min,将试管放入沸水中5 min,各试管显色呈蓝绿色,取出试管,冷却至室温。用2.00 mL 蒸馏水按照上述操作作为空白参比,于 640nm 波长下比色,测定各试管溶液的吸光度。以吸光度为横坐标,淀粉浓度作为纵坐标,绘制工作曲线,进行曲线拟合,得到吸光度和淀粉浓度之间的回归方
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