分子生物学笔记：GST pull-down assay.docxVIP

GST pull-down assay GST pull-down 实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青 睐。 其基本原理是将靶蛋白-GST（Glutathione-S-transferase 谷胱苷肽巯基转移酶）融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的 蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过 SDS电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白,“诱饵蛋白”和 “捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获