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- 2023-01-30 发布于江苏
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分子生物学复习提纲
H 克隆载体
H1 质粒载体的设计
1、线性载体片段自身环化所形成空质粒载体。自环化载体可以通过转化克隆中销量提取质粒,然后进行酶解以及随后的琼脂糖凝胶电泳分析,但是不方便进行大规模筛选。
2、pBR322 是最早开发出来的质粒载体,其包含两个抗生素基因,如果目的 DNA 片段插入到这两个基因的任意一个编码区内,就会发生插入失活,继而可以通过由转化子所显示的抗生素抗性来鉴定重组体。
3、通过在转化和铺板的操纵中对于不同抗生素敏感性的菌株来进行重组型检测,过程较常规。
4、蓝白斑筛选(重点):利用一种蓝色化合物的形成作为指示剂,在此情况下失活的基因是 lacZ,which
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