胶质瘤细胞中干细胞分离的实验研究（公共卫生与预防医学论文资料）.docVIP

胶质瘤细胞中干细胞分离的实验研究（公共卫生与预防医学论文资料） 文档信息 ： 文档作为关于“医学心理学”中“神经内外科”的参考范文，为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文11675字，doc格式，可编辑。质优实惠，欢迎下载！ 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 2 文1：胶质瘤细胞中干细胞分离的实验研究 2 1材料和方法 3 1.1材料 3 1.2方法 3 1.2.1细胞培养基 3 1.2.2U-251中BTSC的分离培养与传代 3 1.2.3有限稀释、单克隆形成实验 4 1.2.4U-251交替在含血清和无血清两种培养基中培养 4 1.2.5U-251中脑肿瘤干细胞的分化 4 1.2.6脑肿瘤干细胞特异性标志物CD133的免疫荧光染色 5 1.2.7免疫组化阳性结果判定 5 1.2.8统计学方法 5 2.1U-251接种于SFM后形成可连续传代的肿瘤干细胞球 5 2.2脑肿瘤干细胞单克隆形成过程的观察 6 2.5脑肿瘤干细胞的分化 8 2.6肿瘤干细胞球的免疫荧光 9 文2：乳腺癌组织中干细胞CD44CD24表型与预后的关系 11 1 资料与方法 13 1.1 一般资料 14 1.2 实验方法 14 1.3 仪器与试剂 14 1.4 结果判断标准 15 1.5 统计方法 15 2 结果 15 2.1 乳腺癌病例基线资料情况比较 15 3 讨论 16 参考文摘引言： 17 原创性声明（模板） 19 正文 胶质瘤细胞中干细胞分离的实验研究（公共卫生与预防医学论文资料） 文1：胶质瘤细胞中干细胞分离的实验研究 脑肿瘤居成人恶性肿瘤发病率前十位，其发病率和死亡率不断升高，严重地威胁着人类健康和生命。虽然外科手术和其他治疗措施进展很快，但仍很难治愈，经手术(放疗和化疗治疗后，病人几乎无一例外地出现肿瘤复发。在过去的20多年中，脑胶质瘤的治疗一直无明显进展[1]，最近研究发现，脑肿瘤中存在着具有干细胞自我更新特性的细胞亚群即脑肿瘤干细胞(braintumotemcell，BTSC)，是引发肿瘤并维持脑肿瘤的生长的细胞来源（tumor-initiatingcell，TIC)，在肿瘤的复发过程中起着决定性的作用[2]。肿瘤干细胞（cancetemcells）是存在于肿瘤中含量较少的具有干细胞性质的细胞群体，它具有自我更新的能力，是形成不同分化程度的肿瘤细胞和肿瘤不断扩大的根源。肿瘤干细胞的消灭就意味着消灭了肿瘤。 本实验中，我们使用成分相对简化成本较低的无血清培养基，应用悬浮培养C（Neuralstemcells，C）的实验方法，从U-251中成功分离培养出具有增殖形成BTS能力和分化能力的BTSC并连续传代。这种悬浮培养方法简便快捷，能有效地分离和传代BTSC，为BTSC的深入研究提供了材料。 1材料和方法 1.1材料 U-251（人胶质瘤细胞）：由昆明医学院附属第一医院免役治疗中心提供，表皮生长因子（购买于PEPROTECHEC公司），硷性成纤维生长因子（购买于PEPROTECHEC公司），DMEM/F12（购买于GIBCO公司），N2添加剂（购买于GIBCO公司），CD133一抗（购买于SIGMA公司），L-谷氨酰胺（购买于AMRESCO公司），羊抗小鼠IG-FITC二抗（购买于昆明贝吉尔科技有限公司） 1.2方法 1.2.1细胞培养基 传统含血清培养基（serum-supplementedmedium，SSM）为含10.00%小牛血清的DMEM/F12（1：1）培养基，并添加L-谷氨酰胺（2mmol/L），胰岛素(4u/L)，青霉素G(1×105u/L)，链霉素(100mg/L)，无血清培养基(serum-freemedium，SFM)，为不含胎牛血清的DMEM/F12（1：1）培养基，并添加重组人表皮生长因子(epide-rmalgrowthfactor，EGF，PeproTech)、重组人碱性成纤维生长因(basicfibroblastgrowthfactor，bFGF，PeproTech)、其它成分同上。 1.2.2U-251中BTSC的分离培养与传代 先将U-251接种于传统SSM中，在培养瓶中传代。待细胞处于对数生长期，用D-Hanks液清洗，胰酶(0.25%)消化，自制巴斯德吸管机械吹打成单细胞悬液，悬于SFM，台盼兰染色并计数，以1×106孔接种于6孔板，在37℃、5.00%，饱和湿度培养箱中培养。待BTSC增殖形成肿瘤干细胞球（braintumophere，BTS）3，4d后