生物化学实验十一血清谷丙转氨酶活性的测定(改良赖氏法)(1).pdfVIP

生物化学--实验十一血清谷—丙转氨酶活性的测定（改良 赖氏法） 实验十一 血清谷—丙转氨酶活性的测定,改良赖氏法, 【目的要求】 1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。 【实验原理】 血清中的谷-丙转氨酶(ALT)，在 37?、pH7.4 的条件下，可催化基质(底物)液 中的丙氨酸与 -酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸: COOH COOH CH 3 CH3 CH 2CH2ALT HN,C,H 2C=O CH CH 22+ COOH COOH 37?、 pH7.4 + HN,C,H C=O 2 COOH COOH a-酮戊二酸 L-丙氨酸 a-丙酮酸 L-谷氨酸 生 成的丙酮酸可与起终止和显色作用的 2,4 二硝基苯肼发生加成反应，生成丙酮酸 - 2,4-二硝基苯腙，进而在碱性环境中生成红棕色的苯腙硝醌化合物，其颜色的深浅 在一定 范围内与丙酮酸的生成量，亦即与 ALT 活性的高低成正比关系。据此与同 样处理的丙酮酸 标准液相比较，便可算出或通过标准曲线查出血清中 ALT 的活 性。 NO NO22 R H