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- 2023-02-24 发布于广东
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* 3、去污剂和表面活性剂 去污剂一般分为离子型和非离子型两大类,都具有长链疏水尾和亲水的极性头。当少量的阴离子去污剂(如十二烷基硫酸钠,SDS )单体加入到蛋白质溶液中时,去污剂与蛋白质表面的疏水区域结合,随着加入量增加,与蛋白质的结合位点达到饱和,这时去污剂则以协同方式结合于蛋白质其它位点,导致蛋白质伸展,分子内部的疏水性氨基酸残基暴露,并进一步与去污剂结合,直到达到饱和为止,从而使蛋白质发生不可逆变性。 第二十三页,共三十五页,2022年,8月28日 * 4、变性剂 高浓度脲(8-10mol/L)和盐酸胍(6 mol/L)常常用于蛋白质变性和复性研究,由于脲或盐酸胍与蛋白质多肽链作用,破坏了蛋白质分子内维持其二级结构和高级结构的氢键,引起蛋白质不可逆失活。 有机溶剂:水互溶有机溶剂可以使酶、蛋白质失去活性,是因为有机溶剂取代了蛋白质表面的结合水,并通过疏水作用与蛋白质结合,改变了溶液的介电常数,从而影响维持蛋白质天然构象的非共价力的平衡 螯合剂 结合金属离子的试剂,如EDTA等可以使金属酶、金属蛋白失活,这是因为EDTA与金属离子形成配位复合物,从而使酶失去金属辅助因子造成的。螯合剂可以螯合对蛋白质有害的金属离子,使那些不需要金属离子的蛋白质稳定。 第二十四页,共三十五页,2022年,8月28日 蛋白质不可逆失活的化学因素 强酸和强碱 强的酸碱可 以改变蛋白 质
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