微生物的鉴定—厌氧菌的鉴定（临床微生物检验课件）.pptx

微生物检验技术----厌氧菌的鉴定学习目标1.掌握厌氧菌常见的种类及生长繁殖特点2.掌握破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒杆菌的形态特点3.掌握厌氧性细菌的鉴定程序及鉴定方法临床医学检验技术考试大纲单元细目要点要求科目厌氧菌 概述（1）厌氧菌的概念、种类与分类熟悉 1、3（2）临床意义熟悉2、3 厌氧菌的检验　（1）标本采集运送掌握 3、4（2）检验程序掌握3、4（3）检验方法掌握　3、4 梭状芽孢杆菌（1）破伤风梭菌掌握　3、4（2）产气荚膜梭菌掌握　3、4（3）肉毒梭菌　掌握　3、4（4）艰难梭菌　掌握　3、4临床医学检验技术考试大纲单元细目要点要求科目厌氧菌 厌氧球菌　（1）消化球菌属　熟悉　3　（2）消化链球菌属　熟悉　3　（3）韦荣球菌属　熟悉　3　 革兰阴性无芽胞厌氧杆菌　（1）类杆菌属　掌握　3，4　（2）普雷沃菌属　了解　3　（3）紫单胞菌属　了解　3　（4）梭杆菌属　了解　3　 革兰阳性无芽胞厌氧杆菌　（1）丙酸杆菌属　了解　3　（2）优杆菌属　了解　3　（3）双歧杆菌属　了解　3　（4）乳杆菌属　了解　3　1厌氧菌的概述厌氧菌的概念、种类与分类（熟悉）1-1临床意义（熟悉）1-2厌氧菌的概念、种类与分类 （熟悉）　1-1■厌氧菌——是生长和代谢不需要氧气，利用发酵而获取能量的一群细菌。■根据有无芽胞可分为：→厌氧性芽胞梭菌（外源性感染——致病菌），包括130种。→无芽胞厌氧菌（内源性感染——条件致病菌），有40多个菌属，300多个菌种和亚种。 主要存在于人及动物肠道、口腔、呼吸道和泌尿道等处，与需氧菌和兼性厌氧菌共同构成机体，人体许多部位厌氧菌在种类和数量上远多于需氧菌，如在结肠中99%的细菌都是厌氧菌。（见下表）厌氧菌的概念、种类与分类 （熟悉）　1-1解剖部位活菌总数厌/需氧菌常见厌氧菌皮肤103-4/cm210:1丙酸杆菌，梭状芽孢杆菌结膜103-4/g 10:1丙酸杆菌牙龈和牙垢1011-12/g1,000:1韦荣球菌，普雷沃菌，卟啉单胞菌，消化链球菌，拟杆菌（脆弱拟杆菌除外），真杆菌唾液108-9/ml3～10:1同牙垢牙齿表面109-10/g1:1同牙垢鼻腔101-4/ml10:1同牙垢胃102-5/ml1:1乳杆菌小肠104-6/g1:1厌氧链球菌，乳杆菌结肠1011-12/g1,000:1拟杆菌，梭杆菌，真杆菌，双歧杆菌，厌氧球菌外尿道103-5/g10:1梭杆菌阴道109-10/ml5:1乳杆菌，拟杆菌，消化球菌，消化链球菌厌氧菌的概念、种类与分类 （熟悉）　1-11-2临床意义（熟悉）　易感因素局部组织的氧化还原电势（Eh）降低穿刺伤等封闭性伤口，血管压迫，肿瘤压迫等等。机体局部的免疫屏障受损机体全身免疫功能下降常见于长期应用氨基糖苷类抗生素治疗无效的病例1-2临床意义（熟悉）　临床特征局部有气体产生为重要指征之一。发生在黏膜附近的感染。深部外伤如枪伤、人或动物咬伤后的继发感染。　　分泌物有恶臭或暗红血色或在紫外光下发出红色荧光，或脓汁中有硫黄颗粒即为放线菌感染。某些抗生素治疗无效的感染。革兰染色着色不均、形态奇特、呈明显多形性；或镜检见细菌而需氧培养为阴性者。1思考练习在厌氧菌中，常见的革兰阳性梭状芽胞杆菌有哪些？梭状芽胞杆菌(1)破伤风梭菌掌握3、4 (2)产气荚膜梭菌掌握3、4(3)肉毒梭菌掌握3、4(4)艰难梭菌掌握3、42厌氧菌的检验标本采集运送（掌握）2-1检验程序（掌握）2-2检验方法（掌握）2-3标本采集运送（掌握）　2-1采集注意事项：避免正常菌群污染，尽量避免接触空气。不同部位标本采集方法如下标本来源 采集的方法封闭性脓肿妇女生殖道下呼吸道分泌物胸腔窦道，子宫腔，深部创伤组织泌尿系统 针管抽取 后穹隆穿刺抽取 肺穿刺术 胸腔穿刺术 静脉注射的塑料导管穿入 无菌外科切开 上阴部膀胱穿刺标本采集运送（掌握）　2-1标本的运送与处理：针筒运送法：适宜液体标本，标本抽取后排尽空气，并将针头插入无菌橡皮塞中即可送检。无菌小瓶运送法：一般采用无菌的青霉素小瓶，瓶内加一定量的培养基和少数氧化还原指示剂，排出瓶内空气，充二氧化碳气体密封。直接用无菌注射器将液体标本注入瓶中即可。标本充盈运送法：适合大量液体标本的运送。厌氧袋运送法：该法一般用于组织块或床边接种的培养皿。棉拭运送法：确保无氧环境，确保不被污染，确保快速送检。检验程序（掌握）　　2-2耐氧试验 检验程序（掌握）　　2-2耐氧试验 在厌氧条件下初代分离的菌落，应检测其对氧的耐受性，只有确认是厌氧菌后才能进一步进行鉴定。耐氧试验方法是将在厌氧培养基上生长的同一个单个菌落（至少要培养48小时以上），分别接种到厌氧血平板（立刻放在厌氧环境中培养）和两块普通血平板上（分别放在大气和5%二氧化碳环境中培养），菌落较小时应先接种厌氧血平