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柠檬酸的发酵制药 柠檬酸的发酵1. 性质(1) 物理性质 分子式C6H8O7,又名枸橼酸,为无色半透明晶体,或白色颗粒,或白色结晶性粉末,无臭,虽有强烈酸味但令人愉快,稍有一点后涩味。它在温暖空气中渐渐风化,在潮湿空气中微有潮解性。(2)化学性质酸性与电离 柠檬酸是较强的有机酸,有3个H+可以电离。与酸反应 柠檬酸与发烟硫酸混合,在常温下即产生乌头酸,稍稍加热能生成α-酮戊二酸。柠檬酸与浓硫酸混合,温度在40℃时产生丙酮、CO2、CO等,加热至150℃时生成乌头酸酐;加热至200 ℃时生成双康酸(C9H10O6)及CO、CO2等。与碱反应 柠檬酸与K2CO3 或KOH或硝酸共熔得到草酸和醋酸或其它盐类;与钠盐(如NaCl)加石灰干馏得到丙酮。在碱液中煮沸时得到丙烯酸(C3H4O2 )。2. 柠檬酸的应用(1)在食品工业上的应用 柠檬酸也称第一食用酸味剂,广泛用作酸味剂、增溶剂、缓冲剂、抗氧化剂、除腥脱臭剂、螯合剂等。(2)在医药上的应用 柠檬酸盐用于补充相应的元素时,具有溶解度高,酸根直接被吸收代谢而无积留等优点。 医药上用的有柠檬酸钠(抗凝血剂)、柠檬酸铁铵(补血剂) 等。(3)在化学工业上的应用 柠檬酸及其盐类和衍生物在化学工业中广泛用作缓冲剂、催化剂、激活剂、增塑剂、螯合剂、清洗剂、吸附剂、稳定剂、消泡剂等。(4)其他方面的应用3. 生物合成途径 柠檬酸合成的途径包括两个生化途径(如图10-1),一个是EMP途径,由糖降解成丙酮酸;另一个是三羧酸循环途径,而柠檬酸就是三羧酸循环中的一个分支。 4、代谢调控5、发酵工艺 5.1 柠檬酸生产菌青霉、毛霉、木霉、曲霉等。(1)以糖质原料生产柠檬酸的黑曲霉;(2)以石油原料生产柠檬酸的如解脂假丝酵母。 5.2 原料薯干、甘蔗渣、废糖蜜、马铃薯、玉米等。5.3 工艺柠檬酸发酵工艺的发展可以分为三个阶段:第一阶段(上世纪20年代):青霉和曲霉表面发酵。第二阶段(始于30年代):曲霉深层发酵的发展。第三阶段(50年代至今):以黑曲霉深层发酵为主,表面和固体发酵并行。 柠檬酸深层发酵工艺 深层发酵的特点是微生物菌体均匀分散在液相中,利用溶解氧,发酵时不产生分生孢子,全部菌体细胞都参与合成柠檬酸的代谢。其优点如下:(1)发酵体系是均一的液体,传热传质良好,不存在死角。(2)设备占地面积小,生产规模大。(3)发酵速率高,采用预培养菌丝球接种时只需50-70h即发酵完毕。(4)产酸率高,产柠檬酸几乎接近理论产率,菌体生成量少,原材料消耗低。(5)发酵设备密闭,杂菌污染的可能性小,管理方便。(6)完全机械化操作,并可以实现自动控制,劳动强度低,劳动生产率高。(7)发酵副产物少,有利于产品提取,所得产品质量高。操作方法:在种子培养基中添加硫酸铵0.3%~0.5%拌匀,待种子培养基冷至约35℃接入黑曲霉麸曲,于35℃下通风培养20~30h。 然后用无菌压缩空气将培养的菌丝体(保持在35℃左右)输入发酵罐中。发酵在35℃左右进行,通风搅拌培养4天。当酸度不再上升,残糖降到2g/L以下时,立即将发酵醪泵送到储罐中,并及时提取柠檬酸。 柠檬酸的提取 成熟发酵醪中除了含有主要产品柠檬酸之外,还含有残糖、菌体、蛋白质、色素、胶体物质、无机盐和有机杂酸,以及原料带入的各种杂质。这些物质必须采用一系列物理和化学方法进行处理。提取工艺有钙盐法、萃取法、离子交换法和电渗析法等。但目前普遍使用的仍是钙盐加离子交换的提取方法。钙盐法提取工艺流程1. 发酵醪预处理 发酵醪成分如下:柠檬酸80%~95%,葡萄糖酸0.2%~0.3%,草酸0.1%~0.3%,残糖0.2%~0.5%。此外还含有蛋白质等胶体物质。在发酵结束之后,应及时将发酵液加热至100 ℃ 。热处理的作用:(1)杀死微生物终止发酵,防止柠檬酸被分解(2)使蛋白质等胶体物质变性凝固,降低发酵液粘度,有利于过滤;(3)使菌体内柠檬酸释放出来,提高收率。2.菌丝过滤3.中和4.酸解脱色5. 树脂净化 强酸型阳离子交换树脂去除Ca2+、Fe3+等金属离子。6. 浓缩与结晶 将酸解液置于60 ℃以下进行减压蒸发,浓缩至70%以上,待结晶。7. 干燥 沸腾干燥箱,去除晶体表面的自由水。温度控制在35℃以下,否则会失去一部分结晶水,影响成品光泽。
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