实验三血清球蛋白的分离纯化及鉴定七制.pptVIP

第一页，共四十页，2022年，8月28日 【实验目的】 1．学习盐析法、凝胶层析和离子交换层析分离纯 化蛋白质的基本原理及应用 2．掌握醋酸纤维薄膜电泳技术的原理及应用 3．了解蛋白质分离纯化的总体思路 第二页，共四十页，2022年，8月28日 【实验方法】 一、盐析法粗分γ-球蛋白 二、凝胶过滤方法脱盐 三、离子交换层析方法纯化γ-球蛋白 四、醋酸纤维素薄膜电泳法鉴定γ-球蛋白的纯度 第三页，共四十页，2022年，8月28日 【基本原理】 蛋白质的分离、纯化及鉴定是研究蛋白质化学性质及生物学功能的重要手段之一。 不同蛋白质的分子量、溶解度及在一定条件下，带电的情况等都有所不同。利用这些性质的差别，可分离纯化各种蛋白质。 第四页，共四十页，2022年，8月28日 分离蛋白质的方法 分离方法 沉淀法 盐析法 有机溶剂沉淀法 层析法 电学法 电泳法 等电聚焦 超速离心法 离子交换层析 吸附层析 凝胶过滤（分子筛） 亲和层析 在分离纯化时，根据情况选用几种方法，相互配合才能达到分离纯化一种蛋白质的目的。 第五页，共四十页，2022年，8月28日 【基本原理】 本实验采用硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶过滤、离子交换层析方法，分离纯化血清γ-球蛋白。最后用醋酸纤维素薄膜电泳法鉴定γ-球蛋白的纯度。 第六页，共四十页，2022年