电泳仪和毛细管电泳仪.pptxVIP

电泳仪和毛细管电泳仪;第一节 电泳;电泳发展简史;20世纪50年代，出现支持物的区带电泳;目前，电泳技术在生物大分子尤其是蛋白质和核酸的分离、分析和鉴定上具有巨大优势。 生物化学与分子生物学的“常规武器”及常用工具。;电泳原理;一、电泳迁移率（Electrophoresis mobility） ; 根据Stoke公式:;电泳迁移率或电泳淌度（?）; ;二、 影响电泳速度的因素;3. 溶液的pH值;4. 溶液的离子强度 I;1). 双电层;2).电渗流（EOF）;电渗流方向;电渗流形状;电渗流的大小;;6. 吸附作用（介质对样品的滞留作用）;电泳方法; 特点： 对蛋白质吸附小，消除拖尾现象 分离速度快 电泳时间短 样品用量少 ;特点：机械强度好、弹性大、透明、 化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、 样品量小、分辨率高 ;利用pH值梯度介质，分离等电点不同的蛋白质; 采用两种不同浓度的电解质组成，一种为前导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分，后者则低于任何样品组分，被分离的组分按其不同的迁移率夹在中间，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中