分子生物学技术的发展与应用 二代测序技术 分子生物学.pptx

二代测序技术主讲人:XXX 二代测序技术——发展历程第二代测序使用最为广泛。以Roche公司的454技术，Illumina公司的Solexa，HiSeq技术为代表 二代测序技术01基本介绍02二代测序技术的方法03二代测序技术的应用 基本介绍01 ——捕捉新合成的末端标记来确定DNA序列第二代测序技术　　边合成边测序或变链接边测序。核心思想　　高通量、自动化。特点 第二代测序技术（大规模平行测序）一代与二代测序技术的区别对模板体外克隆→单独反应模板DNA打断成小片段→文库扩增→测序。第一代测序技术 第二代测序仪技术的优点优点01保证高准确性02降低测序成本03提高测序速度 二代测序技术的方法02 　　焦磷酸测序：是一种由DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶催化的新型酶级联化学发光测序技术，通过对DNA合成反应中释放的生物光信号完成实时监测，开创边合成边测序先河。焦磷酸测序 原理每轮测序反应体系—— 一种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)配对测序引物的3′末端焦磷酸(PPi)释放ATP5-磷酰硫酸（APS）ppi形成荧光素氧化荧光素 DNA聚合酶掺入的dNTP＝释放的Ppi ATP硫酸化酶催化荧光素酶催化可见光 CCD感应器——