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结合相 游离相 ELISA 间接法 夹心法 竞争法 二、免疫细胞检测技术 1、细胞表面标志检测 2、细胞功能检测 3、细胞因子检测 常用的免疫细胞表面标志检测技术 一、免疫标记检测 1、荧光抗体法 2、酶免疫检测法 3、免疫金银染色法 二、补体依赖的细胞毒试验(CDC) 三、E花环形成试验 SmIg的荧光抗体检测法 SmIg的酶免疫检测法 补体依赖的细胞毒试验(CDC) 染料 补体 E-花环 T细胞 B细胞 花环形成细胞 绵羊红细胞 一、转化、增殖试验 1、淋巴细胞转化试验 2、混合淋巴细胞培养 二、细胞毒检测 1、T细胞介导的细胞毒试验 2、NK活性测定 3、ADCC作用测定 常用的免疫细胞功能检测技术 放射性测定 3H-TdR 丝裂原(抗原)刺激 淋巴细胞转化试验原理示意 放射性测定 细胞毒试验原理示意 靶细胞 效应细胞 分离上清 可检测的细胞因子 白细胞介素(Interleukin)—— IL-1、IL-2、…… IL-18 干扰素(Interferon)—— IFN-?、IFN-?、IFN-? 肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor)—— TNF- ?、 TNF- ? 集落刺激因子(Colony-stimulating factor)—— M-CSF、G-CSF 转化生长因子(Transforming growth factor)—— TGF- ? 趋化因子(Chemokine)—— IL-8、GROs、MCP-1 生长因子(Growth factor)—— EGF、FGF、IGF、PDGF 细胞因子检测的特点 1、免疫原性较弱 2、样品含量低 3、样品具有时效性 4、生物效应特异性差 细胞因子检测的方法 1、免疫标记技术检测——抗原性测定 2、细胞生物学方法检测——生物活性测定 3、分子生物学技术检测——mRNA表达测定 特异性免疫获得方式: 自然免疫、人工免疫 自然被动免疫:如胎儿从母体获得IgG 婴儿从母体获得IgM 自然自动免疫:感染病原体后获得免疫力 人工自动免疫: 接种类毒素、疫苗等 人工被动免疫:注射抗毒素、丙种球蛋白等 第二节??? 免疫预防 思考题: 1.你知道注射“乙肝疫苗、卡介苗、白白破三联疫苗”的目的是什么?机制?属于何种免疫? 2.你知道注射“丙球、胎盘球蛋白、抗毒素、IL-2、IFN”的目的是什么?机制?属于何种免疫? 3.注射疫苗和注射丙球等制剂获得免疫力的方式各有什么特点? 4.请你举一个实例说明何时使用疫苗、何时使用丙球等制剂?理由及注意事项。 人工免疫 定义:根据特异性免疫应答的原理,采用人工方法将Ag/Ab制成各种制剂,接种于人体,使其产生/获得特异性免疫力,达到预防某些疾病的目的。 分类: 1、人工主动免疫 用疫苗或类毒素等抗原接种机体,使之产生特异免疫,从而预防感染的措施。 2、人工被动免疫 用抗体或细胞因子等制剂,使之获得特异免疫,以治疗或紧急预 防感染的措施。 一、 人工主动免疫 (artificial active immunity): 定义: 人工主动免疫将疫苗(vaccine)或类毒素接种于人体,使机体产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施,主要用于预防。 人工主动免疫生物制剂: 灭活疫苗(死疫苗):选用免疫原性强的细菌,经人工大量培养后,用理化方法杀死而成。 减毒活疫苗:用减毒或无毒力的活病原体制成。 类毒素:细菌外毒素经0.3%-0.4%甲醛液作用3-4周后,毒性消失但仍保持免疫原性。 亚单位疫苗:根据细菌抗原分析,查明不同致病菌的主要保护性免疫原存在的组分,然后将之制成的疫苗。 DNA重组疫苗:通过DNA重组技术制备所需的疫苗。 核酸疫苗:或称DNA疫苗、基因疫苗,是将能编码引起保护性免疫应答的病原体免疫原基因片段和质粒载体直接注射入宿主体以表达目的免疫原,进而诱导出体液和细胞免疫的新型疫苗。 治疗性疫苗 免疫学应用 第一节 免疫学诊断 一、抗原抗体的检测 二、淋巴细胞的检测 一、抗原抗体的检测 原理: Ag与相应Ab在体内与体外可发生特异性结合 检测原则: 1. 已知Ag检测未知Ab 2. 已知Ab检测未知Ag 细菌学诊断 标本采集时应注意无菌操作,尽量避免杂菌污染。 根据致病菌在不同病期的体内分布和排出部位,采取不同标本。 应在使用抗菌药物前采集标本,否则在培养时应加入拮抗剂。 尽可能采集病变明显部位的材料。 标本必须新鲜,采集后尽快送检。 送检过程中要采取适当的保存方式。 标本采集与送检
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