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- 2023-03-24 发布于湖北
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第八讲 疫苗及其分类;疫苗(vaccine) ;;活疫苗 ;死疫苗 ;基因疫苗; ; 疫 苗 研 究 技 术;弱毒疫苗(attenuated vaccine) ;重组活疫苗(recombinant live vaccine) ;基因工程活载体疫苗(genetic engineering live vector vaccine) ;病毒复制非必需片段基因鉴定
病毒复制非必需片段基因克隆
外源基因插入非必需片段基因中间(即重组载体)
将病毒基因和重组载体基因共转染至细胞,同源重组,产生感染性病毒粒子
筛选稳定的重组病毒;重 组 病 毒 载 体; ;痘病毒载体中表达的外源基因; 人Ad2和Ad5 :外源基因容量为20kb左右。
E3:病毒复制的非必须区,允许插入的外源基因的最大长度为4.0Kb。外源基因一般不需要加基因表达调控元件,利用腺病毒本身的调节元件,即外源基因可插在E3启动子后,在感染早期有效表达。[HIV-1、狂犬病毒]
E1:为病毒复制必须区。缺失E1区的人腺病毒必须在特殊的工程细胞中(比如293细胞系(人胚肾细胞))或非缺失的腺病毒辅助下才能复制增殖,因此称为病毒缺陷型载体。;腺 病 毒 载 体 优点
;基因组较大,约150kb,含70个编码基因,其中至少20%的基因是非必需基因,可容纳多个外源基因的插入。
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