环境化学(3-2-9)--水体富营养化指标——总磷和叶绿素测定实验.pptVIP

2008-05-16 环境与资源实验教学中心 谢晓梅 环境化学实验Laboratory Experiments inEnvironmental Chemistry 浮游植物的主要光合色素是叶绿素（Chlorophyll），常见的有叶绿素a、b和c 叶绿素-a存在于所有的浮游植物中，大约占有机物干重的1～2%，是估算浮游植物生物量的重要指标 浮游植物细胞内叶绿素-a含量随种类或类群而有所不同，同时还受年龄、生长率、光和营养条件的影响。 两只250 mL锥形瓶+100 mL水样 同时以蒸馏水作一份空白参比 冷却后 至微红色 浅红色刚好褪去 转入100mL容 量瓶中 定容，备用 * 加热过程中注意补加蒸馏水使其体积为25～50mL（锥形瓶壁上有白色絮凝物，需用蒸馏水将其冲入溶液中） 200mL水样 将滤膜卷起 剪碎 放入10 mL离心管中 倒入1 cm比色皿 以试剂空白为参比，分别 在波长665、750 nm处测定其吸光度 再分别测定A665nm及A750nm * 如有混浊可离心萃取 1. 总磷 由标准曲线查得水样中磷的含量，按下式计算水样中磷的含量： Cp =WP /V 式中： Cp—水中磷的含量，mg/L； WP —由标准曲线上查得的磷含量，μg； V—测定时吸取水样的体积，mL。 2. 叶绿素-a 用下式计算叶绿素-a的含量（μg/L）： 叶绿素-a = 29(A-Aa) V萃取液 / V样品 式中： A—酸化前，A=A665 - A750； Aa—酸化后，Aa =A665a - A750a； V萃取液—萃取液体积，mL； V样品 —样品体积，L。 3. 根据测定结果，并查阅有关资料，评价水体富营养化状况。 思考题 水体中氮、磷的主要来源有哪些？ 测定总磷是有哪些干扰？如何消除？ 用90% 丙酮提取叶绿素-a后，为什么用离心的方法澄清萃取液，而不用过滤的方法？ 测定叶绿素-a时的采样方法有哪些？ 注意事项 测定总磷的最大吸收波长在880 nm处，但一般的分光光度计没有此波长，所以选用710nm波长测定。 测总磷时，在加热水样过程中，要注意补加蒸馏水，以免蒸干。 测定叶绿素-a时，用A665nm减去A750nm是为了校正混浊液。 注意事项 浮游藻类不仅含有具有光合活性的叶绿素-a，还存在无光合活性的脱镁叶绿素-a，后者在接近前者的波长处有吸收，会产生干扰。测定叶绿素-a时，加盐酸酸化可将叶绿素-a降解为脱镁叶绿素-a，可除去脱镁叶绿素-a的干扰。 浮游植物体积小结构简单，提取剂易于渗入细胞之中，无须研磨，就可较完全地提取出叶绿素-a。 * * * * * 谢晓梅（博士，高级工程师） 环境与资源实验教学中心 水体富营养化指标——总磷和叶绿素 富营养化 eutrophication 在人类活动的影响下, 生物所需的 氮、磷等营养物质大量进入湖泊、 河口、海外等缓流水体, 引起藻类 及其他浮游生物迅速繁殖, 水体溶 解氧量下降, 水质恶化, 鱼类及其他 生物大量死亡的现象 贫营养状态 这种自然过 程非常缓， 常需几千年 甚至上万年 富营养状态 沉积物不断增多 沼 泽 陆 地 湖泊 自然状态 人为排放含营 养物质的工业 废水和生活污 水所引起水体 富营养化现， 则可以在短时 期内出现 N、P等植物营养物质过剩 刺激藻类及水草生长 干扰水质净化 BOD5升高 水源保护的严重问题 农业 工业废水 垃圾 生活污水 藻 类 水 体 复杂的动态平衡体系 污染物 藻类的种类和数量的变化 评价富营养化的状态 总磷 叶绿素-a 初级生产率 0.200～0.400 0.005～0.010 贫—中 0.400～0.600 0.010～0.030 137～409 中 ＞1.500 ＞0.100 410～547 富 0.600～1.500 0.030～0.100 中—富 ＜0.200 ＜0.005 0～136 极贫 无机氮／mg?L－1 总磷／mg?L－1 初级生产率(O2)/mg?㎡?d－1 富营养化程度 水体富营养化程度的划分 实验目的 掌握总磷