DB14T 1637-2018萱草种苗组培快繁技术规程.docxVIP

DB14方 标 DB14 方 标 准 DB 14/ T 1637—2018 山 西 省 地 B 62 萱草种苗组 萱草种苗组培快繁技术规程 2018 - 01 - 10 发布 2018 - 03 - 10 实施 山 西省质量技术监 督局 发 布 I DB14/ T 1637—2018 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 组织培养 2 5 炼苗和移栽 3 6 移栽后管理 3 7 病虫害防治 3 8 组培穴盘苗的质量要求 3 9 包装、运输 4 附录 A(规范性附录) MS 基本培养基成分表 5 II DB14/ T 1637—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由山西省农业科学院提出并归口。 本标准起草单位：山西省农业科学院园艺研究所、山西梅芝园艺有限公司。 本标准主要起草人： 曹冬梅、付宝春、秦国杰、梁峥、贾民隆、段九菊、李永平、郑梅梅、张超、 宋卓琴、康红梅。 1 DB14/ T 1637—2018 萱草种苗组培快繁技术规程 1 范围 本标准规定了萱草种苗组培快繁的术语和定义、组织培养、炼苗和移栽、移栽后管理、病虫害防治、 出苗、质量标准、包装和运输。 本标准适用于萱草组培苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单) 适用于本文件。 GB/T 8321(所有部分) 农药合理使用准则 NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 DB14/T 1381 萱草栽培技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 萱草 具有观赏价值的萱草属植物的统称。 3.2 外植体 从自然生长的活体植物上获取的用于建立植物组培快繁体系的原始材料。 3.3 组培苗 利用植物组织、器官等外植体， 通过植物组织培养技术获得的种苗。 3.4 玻璃化 植物组培过程中出现的一种生理病变，表现为组培苗生长异常，幼叶或愈伤组织呈半透明、水浸状， 植株矮小失绿， 叶片皱缩卷曲。 2 DB14/ T 1637—2018 3.5 组培穴盘苗 组培生根苗移栽在穴盘中培育的苗子。 4 组织培养 4.1 培养基配制 选用MS为基本培养基，培养基成分见附录A。 愈伤组织诱导培养基：MS + 6-BA 4mg/L + KT 0.5 mg/L + NAA0.4 mg/L + 蔗糖20 g/L + 琼脂6 g/L， pH 5.8。 不定芽分化和继代培养基：MS + 6-BA 1 mg/L+ KT 0.5 mg/L + NAA0.05 mg/L + 蔗糖20 g/L + 琼 脂6 g/L，pH 5.8。 生根培养基：1/2 MS + NAA 0.5 mg/L + 蔗糖20 g/L + 琼脂6 g/L， pH 5.8。 4.2 外植体的采集 4.2.1 采集时间 连续晴天2 d以上， 上午8时~11时。 4.2.2 采集部位 在无病害的萱草种植基地，选取生长健壮、无病害的萱草植株，待花梗抽出、花苞未开放时，采集 花苞基部向下4 cm~5 cm的花梗作为外植体备用。 4.2.3 采集材料的处理 即采即用。超过1 h需用湿润的毛巾或滤纸包裹，然后置于温度为0 ℃~4 ℃的冰壶或冷藏室中保 存，保存时间不超过24 h。 4.3 外植体灭菌消毒 4.3.1 预处理 自来水冲洗外植体表面， A)将材料放入烧杯中，用0.7 g/L洗洁精水溶液浸泡5 min~10 min，B) 用自来水流动冲洗30 min，C)蒸馏水清洗3~4次，将材料取出放置于无菌干燥滤纸上，吸干表面水分置 于超净台上。 4.3.2 灭菌消毒 在超净工作台上， 用浓度为75 %的酒精表面消毒30 s，再在质量体积百分比浓度为0.1 %氯化汞溶 液中灭菌12 min，无菌水冲洗干净， 无菌滤纸吸干表面水分， 用消毒刀片切去外部变褐的部分。 4.4 接种和愈伤组织诱导 将花梗切成1 cm的切段作为外植体材料接入到愈伤组织诱导培养基中，培养温度25 ℃，暗培养30 d 后生成愈伤组织。 4.5 不定芽的分化和继代培养 3 DB14/ T 1637—2018 将得到的愈伤组织接种于分化培养基上进行不定芽的诱导，诱导出的丛生芽在分化培养基上继代增 殖两次，获得丛生芽。培养条件为温度23 ℃~25 ℃，光照强度3 000 Lx，光照时间16 h/d。继代次数 不超过6次。 4.6 生根培养 将继代培养的丛生芽在无