单抗5月27日-公开课PPT课件.ppt

湖北黄陂一中 冯燕 科 勒米尔斯坦荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 细胞膜的流动性灭活病毒、PEG、电激等诱导的手段？融合后细胞的类型？AB杂种细胞遗传物质有什么特点？三种AA、AB、BB（A、B）含两种生物的遗传物质1.动物细胞融合过程原理？ 1.动物细胞融合过程 为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性保留融合活性 ※动物细胞融合技术的意义和应用 抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是浆细胞。※抗体的产生过程B淋巴细胞浆细胞记忆B淋巴细胞分化浆细胞 ※抗体的传统生产方法抗原 反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢？ 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。※概念单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体2.单克隆抗体 提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。※制备2.单克隆抗体 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 ①给小鼠注射特定的抗原蛋白的目的是什么？②细胞两两融合后，会形成几种融合的细胞？ ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ ④为何要对杂交瘤细胞进行筛选？如何筛选？ ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？ BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活获得产生相应抗体的B细胞（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。 幻灯片 13 ※单克隆抗体的应用诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。 “生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物 单抗导向，药物为弹头治疗疾病和运载药物主要用于癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。 单克隆抗体筛选杂交细胞杂交瘤细胞体外或体内细胞培养筛选骨髓瘤细胞诱导细胞融合特异性杂交瘤细胞杂交瘤细胞系提取经过免疫的B淋巴细胞动物细胞融合技术动物细胞培养技术单克隆抗体的制备过程：特点：既能产生专一抗体又能大量繁殖特点：特异性强灵敏度高可大量制备注射抗原免疫 1、只能使动物细胞融合的常用诱导方法是 （ 　）A．PEG　　 B．灭活的病毒 　 C．电刺激 D．离心【课堂检测】B 2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养 可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 （ ）淋巴细胞 淋巴细胞淋巴细胞 淋巴细胞【课堂检测】A 3、请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 【课堂检测】 谢谢