(50)--9.2.1工具酶临床分子生物学检验技术.pptVIP

切：酶切限制性内切酶(restriction endonuclease，RE) ：能够识别和水解DNA分子内特异序列的核酸水解酶类。基因的剪刀 细菌中存在位点特异性限制酶和特异性甲基化酶，构成了寄主控制的限制—修饰系统(Restriction-modification system，R-M)，是细菌安内御外的积极措施。细菌R-M系统的限制酶可以降解DNA，为避免自身DNA的降解，细菌可以修饰（甲基化酶）自身DNA，未被修饰的外来DNA则会被降解。限制—修饰系统 限制性核酸内切酶的命名属名＋种名＋菌株类型＋发现的顺序EcoR IEscherichia属名coli种名Ry13株系编号限制性内切酶名称的英文缩写前3个字母要用斜体。Approximately 2600 different restriction enzymes are known, with over 230 cleavage specificities. 性质Ⅰ型Ⅱ型Ⅲ型结构与功能三亚基多功能酶单一功能的酶同型二聚体二亚基双功能的酶限制与修饰酶蛋白同时具有甲基化作用酶蛋白不具有甲基化作用酶蛋白同时具有甲基化作用辅助因子ATP,Mg2+,SAMMg2+ATP,Mg2+,SAM切割位点在距特异性位点至少1kb的地方位于特异性位点或其附近在距特异性位点3′端24~26bp处切割方式随机切割特异切割特异切割用途无十分有用有用限制