DNA重组质粒的构建概述.pptxVIP

DNA重组质粒的构建;基因克隆 gene cloning 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子〔重组体〕，继而通过转化或转染宿主细菌或细胞筛选出含有目的基因的转化子细菌或细胞，再进行扩增提取获得大量同一DNA分子拷贝。 核心技术DNA重组技术 〔 recombinant DNA technique 〕 ;基因克隆的根本程序 分 — 切 — 接 — 转 — 筛 PCR 酶切 连接 转化转染 抗性或标记筛选 目的基因DNA片段的获得 外源DNA分子与载体DNA分子的体外重组 重组DNA分子转移到适当的受体菌或细胞 重组DNA 分子克隆的筛选和鉴定 目的基因或其表达产物的纯化和鉴定 基因克隆技术的特点 1. 可在体外人工的, 有目的的, 根据需要进行基因的重组表达测序诱变修复； 2. 方法简便快速准确特异，能保证研究与开发的需要。;基因克隆示意图;胰岛素 人生长激素 干扰素 白细胞介素2 粒细胞集落刺激因子 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 红细胞生成素 EPO 组织纤溶酶原激活剂 生长激素 促生长素 抗血友病因子Ⅷ 脱氧核糖核酸酶 葡糖脑苷脂酶 鼠单克隆抗体;例 干扰素是治疗癌症的重要物质，人血液中每升只能提取0.0